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产品:RFP-Magnetic免疫沉淀试剂盒(含1.5ml,6孔磁力架) 25T

产品信息


产品名称:

RFP-Magnetic免疫沉淀试剂盒(含1.5ml,6孔磁力架) (货号:PRM025-25T)

产品规格:

25T

销售价格:

¥3,465.00 / 25T

产品其他说明


RFP-Magnetic 免疫沉淀试剂盒

PROCAP RFP-Magnetic IP/CoIP KIT)



产品货号PRM025

存储条件IP buffer存储于-20°C,RFP-Magnetic beads可在4℃保存1年,或在-80℃长期保存。请根据各组分适合储存条件存放,并避免反复冻融。

 

试剂盒组分:

货号

名称

规格

RNM-25-1000

MYC-Nanoab-Magnetic

1000ul(25T)

IP001A

裂解液A

50ml

IP001B

裂解液B

50ml

IP001C

漂洗液C

50ml

IP001D

漂洗液D

50ml

IP001E

洗脱液E

3x1ml

CLJ0615

磁力架1.5ml,6孔


产品简介

LABLEAD的免疫沉淀beads是基于基因工程改造的纳米抗体开发的;纳米抗体由传统抗体的重链可变区(VHH)组成,具有分子量小、亲和力高、特异性强,且耐酸碱高温环境等特点;基于纳米抗体的优点,LABLEAD的免疫沉淀beads避免了免疫沉淀结果出现轻重链污染的现象,并且节省实验时间。

实验步骤

提示:尽量在4℃进行操作,洗脱蛋白方法一除外。

1.收集细胞:

根据实验要求收集适量的细胞,通常每个免疫沉淀反应大约使用 106-107个细胞。

2.裂解细胞:

根据实验要求选择使用溶液A或溶液B裂解细胞。在溶液A或溶液B中加入蛋白酶抑制剂,用500μl预冷的溶液A或溶液B重悬细胞;置于冰上30分钟,可每10分钟充分吹打一次;

4℃,20,000g离心15分钟,将裂解产物(上清)转移到一个新的预冷管中,丢弃沉淀。

3.平衡珠子:

振荡充分混匀珠子, 吸取40μl RFP beads到500μl预冷的溶液A或溶液B中,4℃,2,500g离心2分钟,或利用磁性分离,丢弃上清液。

4.结合蛋白:

将平衡好的beads加入到细胞裂解产物中,于4℃旋转混合结合30min-1h。

5.清洗珠子:

根据实验要求选择使用溶液C或溶液D清洗beads。4℃,2,500g离心2分钟,或利用磁性分离,丢弃上清液。用500μl预冷的溶液C或溶液D重悬beads,4℃,2,500g条件下离心2分钟,或利用磁性分离,丢弃上清液并重复洗涤3次。

6.洗脱蛋白

方法一:

加入20μl 2×SDS-sample buffer重悬beads。95℃,加热10min充分变性,2,500g离心2分钟或利用磁性分离收集上清,收集的产物可进行SDS-PAGE及免疫印迹分析。

方法二:

加入溶液E洗脱结合的蛋白,孵育时间30秒,期间不断混匀,2,500g离心2分钟或利用磁性分离收集上清,为了中和酸性的甘氨酸,需加入5μl 1.0 M Tris(pH10.4)。

注意:为了提高洗脱效率可以重复这一步。收集的产物可进行SDS-PAGE及免疫印迹分析。

注意事项

1、关于裂解液的选择:

裂解液A为温和裂解液,裂解液B为强裂解液,请根据自己实验样本选择相应的裂解液,如:若为胞质蛋白可选裂解液A或者A与B混合使用,若为核蛋白则可选择裂解液B。

漂洗液 C 和漂洗液 D 的选择(裂解液 D 为高盐溶液,可能会破坏蛋白间较弱的相互作用),若两个 蛋白相互作用强可选 C 或者 D;若两个蛋白相互作用弱的优先 C。

2、为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。

3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



暂无FAQs

暂无COA

暂无相关文献

所属品牌

LABLEAD
北京兰博利德商贸有限公司(LABLEAD)公司,成立于2007年。 专业从事生命科学方面的服务,为客户提供试剂、耗材、仪器等产品,主要涵盖生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学、植物学、免疫学、免疫诊断、分子诊断等领域。

 

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