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产品:转染试剂 Transfection Reagent 1.5ML

产品信息


产品名称:

转染试剂 Transfection Reagent (货号:TR001-1.5ML)

产品规格:

1.5ML

销售价格:

¥752.00 / 1.5ML

产品其他说明



                                                 Transfection Reagent


货号:TR001

储存条件:2-4℃保存一年。(避免冷冻)  


产品说明

Transfection Reagent是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞,具有低细胞毒性;对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。

适用范围:贴壁细胞和悬浮细胞(哺乳动物细胞系)的转染。

质粒DNA的转染

对大多数细胞来说,DNA(µg)与Transfection Reagent(µl)的比例为1:2~1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平,并能减少细胞毒性。


l24孔板为例

贴壁细胞:转染前一天,用500 µl不含抗生素的培养基接种0.5~2×105细胞,使之第二天能达到70-90%汇合。

悬浮细胞:在准备DNA-Lip2000复合物之前,用500 µl不含抗生素的培养基接种4~8×105细胞即可。


l对每个转染样品,进行以下操作

a.eppendorf管里分别加入50 µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA轻柔混匀,制成DNA稀释液。

b.在另一个eppendorf管里分别加入50µl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 µlTransfection Reagent(注意用前先混匀),轻柔混

 匀,制成Transfection Reagent稀释液,室温静5分钟。

c. 将DNA稀释液和Transfection Reagent稀释液混合,轻柔混匀,室温静置20分钟, 形成DNA-Transfection Reagent复合物。DNA-Transfection Reagent复合物在室温下可稳定存在6小时。

d.将DNA-Transfection Reagent复合物加入到接种好的细胞中,将培养板轻轻地前后摇动,使复合物分散均匀。

e.在37℃ CO2培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18~48小时。

f.如果要筛选稳定细胞株,则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中,第二天加 入选择性培养基进行筛选。

质粒DNA转染的优化 为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响,可以对DNA和Transfection Reagent的比例以及细胞密度进行优化,一 般在1:0.5~1:5的范围内优化DNA(µg)和Transfection Reagent (µl) 的比例。

不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及Transfection Reagent用量

细胞

培养板

每孔面积

培养基用量

DNA转染

siRNA

 

培养基用量

 

培养基用量

96-well

0.3 cm2

100 ul

2 × 25 µl

0.2 µg

0.5 µl

5 pmol

0.25 µl

24-well

2 cm2

500 ul

2 × 50 µl

0.8 µg

2.0 µl

20 pmol

1.0 µl

12-well

4 cm2

1 ml

2 × 100 µl

1.6 µg

4.0 µl

40 pmol

2.0 µl

6-well

10 cm2

2 ml

2 × 250 µl

4.0 µg

10 µl

100 pmol

5 µl

60-mm

20 cm2

5 ml

2 × 0.5 ml

8.0 µg

20 µl

200 pmol

10 µl

10-cm

60 cm2

15 ml

2 × 1.5 ml

24 µg

60 µl

600 pmol

30 µl

Transfection Reagent转染试剂用于不同细胞转染时用量参考(以96孔板为例)

细胞型号

培养基

每孔细胞数

DNA的量

转染试剂量

293H

DMEM

3x104

0.2 ug

0.5 uL

293FH

DMEM

3x104

0.2 ug

0.5 uL

293E

DMEM

3x104

0.2 ug

0.5 uL

293F

DMEM

3x104

0.2 ug

0.5 uL

COS7

DMEM

1.5x104

0.4 ug

0.5 uL

HELA

DMEM

2x104

0.3 ug

0.5 uL

Cao2

MEM

3.5x104

0.3 ug

0.75 uL

BHK21

MEM

2x104

0.2 ug

0.5 uL

CHO-DG44

DMEM+HT+pro

2x104

0.5 ug

0.5 uL

RAW264.7

DMEM

3x104

0.2 ug

0.5 uL

MCF7

MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin

+sodium pyruvat

2x104

0.1 ug

0.25 uL

SW480

IMDM

3x104

0.4 ug

0.5 uL

MDCK

DMEM

4x104

0.6 ug

1 uL

CHO-K1

IMDM+pro

3x104

0.2 ug

0.5 uL

HepG2

DMEM

3x104

0.5 ug

0.75 uL

A549

DMEM

2x104

0.3 ug

0.5 uL

NIH/3T3

DMEM

1.5x104

0.1 ug

0.75 uL

Vero

DMEM

3x104

0.3 ug

0.75 uL

Sf9

SIM SF

5x104

0.4 ug

0.75 uL


注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

本品仅用于实验研究。



暂无FAQs

暂无COA

暂无相关文献

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北京兰博利德商贸有限公司(LABLEAD)公司,成立于2007年。 专业从事生命科学方面的服务,为客户提供试剂、耗材、仪器等产品,主要涵盖生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学、植物学、免疫学、免疫诊断、分子诊断等领域。

 

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