保质期 6个月

一般说明

谷胱甘肽(GSH)是多种抗氧化酶的辅因子。它参与维生素C和维生素E再生，调节细胞增殖和凋亡。谷胱甘肽对线粒体功能和维持线粒体DNA(mtDNA)至关重要。其基因的突变与阿尔兹海默症、帕金森病和亨廷顿病有关。它还与囊性纤维化、免疫疾病和心血管疾病有关。还原型谷胱甘肽(GSH)，是三肽类化合物 (g-谷氨酸-半胱氨酰甘氨酸)，是大多数活细胞中主的自由巯基，参与多种生物学过程，如：外来化合物解毒，清除过氧化氢物，维持蛋白巯基化物的氧化状态。它是动物组织中重要的抗氧化物质。本测试利用DTNB能与还原型谷胱甘肽反应产生黄色产物特性，在波长为412nm下检测，其吸光度与样本中谷胱甘肽的含量对成正比；最低可检测0.4μM的GSH。

产品应用：

检测血清、血浆、尿液、组织和细胞提取物中的还原型谷胱甘肽含量。

试剂盒规格和保存

试剂A：30 mL          4°C保存

试剂B：30 mL     4°C保存

校准品：10 mL   4°C保存

样本制备：

注意：使用前须置试剂至室温，并充分摇匀试剂A。

全血样本需用水稀释20倍（n = 20）。

检测步骤：

1.准备空白对照：300μL水；

稀释校准品：100μL校准品+200μL水，分别放入透明平底96孔板。

2. 样本：全血样本需用水稀释20倍（n = 20）。在1.5mL离心管中混合120μL样本和120μL试剂A。如果出现浑浊，在转速14000rpm下离心5分钟。

3. 取200μL样混合物放入96孔板的孔中，加入100μL的试剂B，轻敲使其混合。

4. 室温下反应30分钟，在412nm的波长下读取OD值。

计算：

谷胱甘肽的浓度为 

n是稀释因数。

单位换算: 10mg/L谷胱甘肽= 32.5μM

 细胞裂解液制备：在4°C、1000g下离心收集2x10⁶个细胞，用冷PBS溶液清洗，并在1-2毫升含有50 mM MES（或磷酸盐 pH 6-7）和1 mM EDTA的冷缓冲剂中，通过细胞匀浆或超声波降解法溶解细胞。在4°C、10000g下离心15分钟，取上清液进行检测。注意：β－巯基乙醇、二硫苏糖醇、半胱氨酸会干扰检测，在样本准备中应避免接触。氨基酸不会产生干扰。

预防措施：试剂仅用于实验研究，使用过程中请遵循实验室试剂安全措施。