
一般描述
蛋白肌酐比值用于监测尿蛋白排出情况的一种新的可靠方法。能够反映24小时尿蛋白量,具有定性、定量检测蛋白尿,其临床意义相一致,用尿肌酐进行矫正,具有操作简便,快捷等优点。正常值小于0.10~0.20,在临床上应用于早期糖尿病,肾病等疾病的尿蛋白定性、定量检测和随访监测。检测范围96孔板:1-20 mg / dL蛋白和1-150 mg / dL肌酐。
有效期 1年
应 用
直接测定:尿样中蛋白质肌酐比值的测定(大鼠,小鼠,人,而非特定物种)。
组 分
PR试剂:24 mL CR试剂A:6 mL
CR试剂B:6 mL 标准液:1 mL
储存: 标准液在-20°C,其它试剂在4°C储存。
注意:试剂仅供研究使用,样品收集后可立即进行分析,或保存在4°C或–20°C下7天。 避免重复冻融。 如果存在微粒,离心样品并使用澄清的上清液用于测定。
蛋白质测定
1. 样品一式两份。将每个样品按每份20 µL分成四份。单独的孔:两个样品孔和两个标准孔。向样品孔中添加5 µL超纯水,向标准孔添加5 µL标准液。将25 µL超纯水转移到两个孔中作为空白对照。注意:每个样本都不需要单独的空白,相同的空白值可用于特定板上的所有样品。
2. 在每个蛋白质测定孔中加入200 µL PR试剂。
3. 在室温下培养10分钟,然后在600 nm处读取吸光度,注意:如果特定样品的OD标准-OD样本低于0.05,用等体积的水稀释样品,然后重复测定。将结果乘以稀释倍数。低标准信号是由于与尿液中其他分子的干扰,稀释度会降低干扰可以正确测量蛋白质水平。
肌酐测定
1. 样品一式两份,将每个样品按每份20 µL分成四份。单独的孔:两个样品孔和两个标准孔。向样品孔中添加5 µL 超纯水,向标准孔添加5 µL标准液。将25 µL 超纯水转移到两个孔中作为空白对照。 注意:每个样本都不需要单独的空白,相同的空白值可用于特定板上的所有样品。
2. 通过混合为所有孔准备足够的工作试剂(WR),按每个肌酐测定孔:50 µL CR试剂A,50 µL CR试剂B和150 µL 超纯水。分别转移200 µL 工作试剂,肌酐测定良好。注意:工作试剂稳定在2小时以内,我们建议您每次运行时都要制备新鲜试剂。
3. 在室温下孵育10分钟,然后在530 nm读取吸光度。注意:如果特定样品的OD标准-OD样本低于0.1,用等体积的水稀释样品并重复测定。将结果乘以稀释倍数。低标准信号是由于与尿液中其他分子的干扰,稀释度会降低干扰可以正确测量肌酐。
计算方式
样品的蛋白质浓度计算如下:

样品中的肌酐浓度计算如下:

样品的蛋白质肌酐比率计算如下:

其中10,000 µg / dL和25 mg / dL是蛋白质和肌酐标准,n为稀释倍数。低于30的蛋白质肌酐比率被认为是正常的, 30–300被认为是轻度蛋白尿(早期肾脏疾病),大于300表示严重蛋白尿。