一般说明
乙醇是许多常用饮料的精神活性成分，它可作为中枢神经系统抑制剂。摄入后，乙醇通过胃和小肠被吸收到血液中。乙醇主要由肝脏代谢，但也在尿液中分泌，或通过呼吸分泌。乙醇水平的监测在发酵过程中也很重要。乙醇检测试剂盒为乙醇的定量提供了一种简单可靠的方法。本公司的乙醇试剂盒是基于乙醇脱氢酶催化氧化乙醇，产物的颜色深浅与样品中乙醇的浓度成正比。最低可检测0.01%的乙醇。
应用
直接检测生物样品如血清、血浆、尿液、唾液中的乙醇含量。
试剂盒组成与保存
缓冲液： 10 mL -20°C保存
MTT 试剂：1.5 mL -20°C保存
酶试剂： 120 mL -20°C保存
终止试剂： 12 mL 常温保存
NAD 试剂: 1mL -20°C保存
标准液：1.5 mL 1% 乙醇 -20°C保存
有效期：1年
检测步骤
1. 标准曲线: 取25 mL 1% 标准品加 225 mL蒸馏水制备0.1%的乙醇预混液，标准品稀释如下：
标号 | 预混液 + H2O | 终量(mL) | 乙醇 (%) |
1 | 100mL + 0mL | 100 | 0.10 |
2 | 60mL + 40mL | 100 | 0.06 |
3 | 30mL + 70mL | 100 | 0.03 |
4 | 0mL + 100mL | 100 | 0.00 |
转移10 mL标准品到透明96孔板的孔中。
样品：加10 mL样品至96孔板的孔中。注意：唾液样品应在测试前用PBS稀释10倍。
2. 反应：在移液前短暂离心酶试剂管，对每一个反应孔，按80 mL 缓冲液, 1 mL酶试剂, 2.5 mL NAD 和14 mL MTT比例制备足量反应试剂。推荐现用现配。向每个孔内快速添加90 mL反应试剂，轻敲孔板使其混合均匀。室温下培养30分钟。每孔添加100 mL
终止试剂，轻敲孔板使其混合。
3. 读取565 nm处波长的光密度。
4. 浓度计算：从标准品的测值中减去空白对照的测值(标号4)，绘制标准曲线(DOD vs 标准乙醇浓度)。测定斜率(Slope)并计算样品中乙醇的浓度：
OD样本 和 OD空白分别是样品和H2O的空白对照OD值。n是样品稀释系数(对唾液样品 n = 10)。
注意: 如果样品酒精浓度高于0.1%，用蒸馏水稀释并再次检测。结果乘以稀释系数。
单位换算：1 vol % 乙醇相当于 170 mM or 785 mg/dL
注意事项：
1. 该测试是基于酶动力学反应，加入工作试剂应迅速并要短暂混合。推荐使用多通道移液器。
2. 样品制备过程中应避免使用下列干扰物质：抗坏血酸,SDS (>0.2%),叠氮化钠,NP-40(>1%)和Tween-20(>1%)。
3.本产品仅供研究用，使用过程中应严格遵循实验安全措施。
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