保质期1年   

说 明

α-淀粉酶，系统名称为1,4-α-D-葡聚糖葡聚糖水解酶，别名为液化型淀粉酶、液化酶、α-1，4-糊精酶。黄褐色固体粉末或黄褐色至深褐色液体，含水量5%~8%。溶于水，不溶于乙醇或乙醚。α-淀粉酶是哺乳动物的一种主要消化酶，人体中淀粉酶水平的增加与唾液腺创伤，及唾液腺、胰腺发炎和肾功能衰竭引起的腮腺炎有关。本公司的α-淀粉酶测试盒运用α-淀粉酶裂解一种不溶性蓝色直链淀粉成可溶性有色产物，在595nm处的吸光强度与样品中淀粉酶的活性成正比。检测范围2 - 300 U/L。

应 用

直接检测血清、血浆、唾液、尿液和其它生物样品中α-淀粉酶的活性。

试剂盒组成与保存

底物试剂:   10 mL                              2-8°C保存

终止试剂:      5 mL                      2-8°C保存

校准液:  2 mL (相当于 550 U/L)               2-8°C保存

检测步骤

样品准备：新鲜的样品最为理想。 冷冻条件下，α-淀粉酶一个月内保持稳定。EDTA, EGTA和柠檬酸盐是α-淀粉酶的抑制剂，在样品准备中应避免使用。

1. 反应：在标记好的1.5mL离心管中加入10 mL 样品。然后加入 190 mL 底物试剂，振荡混合后培养5分钟。

注意：底物试剂包含的蓝色不溶性物质会形成沉淀。量取前应当倒置瓶10数次以使底物维持悬浮状，再迅速将底物转移到样品离心管。如果测试要在 37°C下进行，应在添加样品之前将底物加热至该温度。

 对空白对照管，需加10 mL水, 190 mL 底物试剂和 80 mL 终止试剂。或者按以下顺序准备空白对照：10 mL 样品， 80 mL 终止试剂和190 mL 底物试剂。 如果样品背景颜色是明显的蓝色，这一步很必要。

2. 将80 mL 终止试剂加入每个样品离心管中。振荡混合并以14,000 rpm速度离心5分钟，小心地将200 mL 上清液转移至透明平底96孔板的孔中。

3.在不同的孔中，加入200 mL 水和 200 mL 校准液。读取595nm 处吸光度。

4. 浓度计算: α-淀粉酶活性计算如下：

OD样品 和OD空白 分别是样品和空白的OD595nm 值，OD校准液 和 ODH2O 分别是校准液和水的OD595nm值。n 是稀释系数，“550” 是校准液在测试环境下的等效活性(U/L)。

注：如果计算出的活性高于300 U/L，将样品用水稀释后重复测试，结果需要乘以稀释系数n。

单位定义：在测试环境下(pH 7.0)，一个酶活性单位是指每分钟催化产生1 mmole 产物。

注意事项：本产品仅供研究用，使用过程中应严格遵循实验安全措施。