产品货号：C5015

储存条件：-20℃保存

产品简介：

菁染料是性能优良的荧光标记染料，摩尔吸光系数在荧光染料中是最高的，其琥珀酰亚胺酯是最常用的脂 肪氨基标记试剂，广泛用于蛋白、抗体、核酸及其他生物分子的标记和检测。通过改变次甲基链的长度，可改变其荧光发射波长，每增加一个双键，按照Hofmann规则正好红移约100nm。

菁染料Cy3和Cy5已成为基因芯片的首选荧光标记物；另外,Cy5, Cy5.5和Cy7的吸收在近红外区背景非常 低，是荧光强度最高、最稳定的长波长染料。特别适合于活体小动物体内成像代替放射性元素。但由于菁染 料，尤其是不对称菁染料的合成副反应多，副产物极性相近，产物的分离提纯相当困难。菁染料特别是水溶性菁 染料分子极性大，分离提纯越加困难。

表1.菁染料琥珀酰亚胺酯的性质参数

操作步骤 

水溶性（脂溶性）Cy5 NHS标记

1. Cy5 NHS 1.0 mg 溶解于400 pL DMS。后，加入到 1mL 的玻璃瓶中盛有(D-seQ-leucine-enkephalin acetate (YSGFLT, 0.75 mg)的400 pL DMS。溶液。(Dye 和peptide 投料比是 1:1)

2. 然后加入15uL三乙胺，常温避光搅拌反应混合物过夜。

3. 用HPLC纯化蛋白，使用蛋白C18柱子(625pxx10mm),每次上样注入2x400uL, 30分钟梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN：HQ (0.1% TFA) =70：30,流速4mL/min°(对不同的蛋白选择不同的合 适HPL C梯度流动相)

4. 收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。

5. 产品冷冻干燥成粉末或在水溶液中，-20°C避光储存；必要肘可用质谱表征。

6. CyDye标记的蛋白稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4 °C可避光保存2月；更长期的保存需加入等 体积的甘油-20 °C避光保存。

稳定性与储存：

未开封的粉末在避光干燥-20°C存放12月。CyDye NHS水溶液现配现用不能储存。任何溶解后的CyDye NHS粉末最好立即使用。

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