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  • 细胞活力检测试剂盒发光法(CTG)(货号:C2570)
  • 细胞活力检测试剂盒发光法(CTG)(货号:C2570)

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CAS:
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货号:C2570-10ml

存储条件: –20°C避光,避免反复冻融,经常使用可4°C保存。

产品简介

细胞活力检测试剂盒发光法 Luminescent Cell Viability Assay,是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而用于超高灵敏度、超宽线性范围定量检测活细胞数目的试剂盒。

本产品操作简单,读数稳定,检测速度快,完成检测仅需约10分钟。本产品比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的单一即用型试剂CellTiter-Lumi™发光法检测试剂与培养细胞等体积混合,反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞,也无需更换或去除培养液。 

使用说明:

细胞的准备:

使用适合进行化学发光检测的96孔板,每孔接种100μl细胞,并确保检测时每孔的细胞数量在3x104个以内,同时设置不含细胞的培养液孔作为阴性对照,按照细胞培养的常规方法培养细胞。如有需要,可加入药物处理细胞。此外,如有必要,也可以设置细胞的浓度梯度,以便后续确定试剂盒的使用效果。

ATP标准曲线的设置(选做):

将自备的ATP标准溶液用PBS或细胞培养液稀释成适当的浓度梯度。初次检测可以设置0、1、3、10、30、100、300、1000、3000nM这几个浓度,96孔板每孔加入100μl 的标准品。如有必要,在后续的实验中可以根据细胞中的ATP含量对标准品的浓度范围进行适当调整。如果用细胞培养液来稀释ATP标准品,稀释后需立即进行后续的发光检测,否则培养液中的ATPase等可以消耗ATP的酶会导致ATP含量下降。

检测试剂的准备:

融解冻存的发光细胞活力检测试剂,如有必要可适当分装该试剂。经测试冻融5次对其检测效果无显著影响。按照96孔板每孔100μl (384孔板每孔25μl) 的量,取适量发光法检测试剂,平衡至室温。

1、细胞活力检测:

1.1取出细胞培养板在室温平衡10分钟(通常不宜超过30分钟)。

1.2 96孔板每孔加入100μl 发光法检测试剂(384孔板每孔25μl)。

1.3 室温振荡2分钟,以促进细胞的裂解。

1.4室温(约25ºC)孵育10分钟,使发光信号趋于稳定。

1.5 使用具有检测化学发光功能的多功能酶标仪进行化学发光检测。请根据仪器要求设置相应的参数,每个孔的检测时间一般为0.25-1秒或更长时间,具体需根据仪器的检测灵敏度进行适当的调整。

1.6 根据化学发光读数直接计算细胞的相对活力,或根据ATP标准曲线计算出ATP的量从而计算出细胞的相对活力。

注意事项:

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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