货号：F0303

存储条件：-20℃

产品组分

产品介绍

All-in-One MasterMix 四代转录酶(with dsDNase)是针对一链 cDNA 合成开发出的一个操作更为简便的系统，包含所有一链 cDNA合成反应所需组分，反应中仅需加入 RNA模板和水。预混液中的M-MLV GIV Reverse Transcriptase是全新开发的第四代逆转录酶，该酶具有更快的反应速度，只需要5分钟就可以完 成逆转录反应过程；更高的产物得率和更长 cDNA 片段的获得；更加宽广的模板使用范围。dsDNase 可在引物及探针存在的情况下特异性消化双链DNA， 不会消化单链 DNA 和 RNA，并且具有热敏感性，可在高温条件下快速地不可逆失活，实现去除基因组污染，能避免dsDNase 在逆转录过程中对DNA 与RNA 杂合链中的DNA 损伤。

产品特点 

1. 预混液包含除 RNA 模板外一链 cDNA 合成反应的所有组分， 操作方便、减少污染。

2. 更快的反应速度。

3. 更高的产物得率和更长 cDNA 片段的获得。

4. 更加宽广的模板使用范围。

使用方法

针对基因组含量高RNA样品

1. 基因组DNA污染去除

①于冰上配制如下反应体系：

a. 推荐使用试剂盒提取的RNA作为模板。 

②轻柔吸打混匀，瞬离；

③ 37℃温育2 min，以去除基因组DNA污染； 注：若RNA中基因组DNA污染严重，可适当延长37℃温育时间至5 min。

④ 65℃温育2 min，使dsDNase失活，冰上放置。

2. 第一链cDNA合成

① 于冰上配制如下反应体系：

② 轻柔吸打混匀后，离心；

③55℃ 孵育5分钟；

注：若目标RNA不含Poly(A) 结构，可预先25℃温育10 分钟；

④ 反应结束后，85℃温育5 min，以终止反应；

⑤ 将获得的cDNA溶液置于冰上，用于后续实验。

注：cDNA溶液置于-20℃储存，建议不超过1周；置于-80℃可长期储存。

针对基因组含量低RNA样品

① 于冰上配制如下反应体系：

a. 推荐使用试剂盒提取的高质量RNA作为模板。

② 轻柔吸打混匀，瞬离；

③ 37℃温育2 min，以去除基因组DNA污染；

④ 55℃温育5 min；

⑤ 反应结束后，85℃温育5 min以终止反应；

⑥ 将获得的cDNA溶液置于冰上，用于后续实验。

注：cDNA溶液置于-20℃储存，建议不超过1周；置于-80℃可长期储存。

注意事项

预混液中已经包含Oligo(dT)20 VN和随机引物，不仅适用于包含 Poly(A) 结构的真核生物mRNA，也适用于不含Poly(A) 结构的原核 生物RNA、真核生物rRNA和tRNA等模板，但不适用于miRNA等小RNA模板。