货    号：D22505

保存条件：−20°C干燥避光保存，保质期2年。激发和发射波长分别为328nm和533nm

CAS#：115144-35-9

中文名：D-虫荧光素钾盐

英文名：D-Luciferin, potassium salt 

结构式：

分子式：C11H7N2KO3S2

分子量：318.41

溶解度（25℃）：H2O：30mg/mL

性质：1. 外观：黄色粉末

2. 纯度：＞98%

3. 产品描述：

D-荧光素（D-Luciferin）是萤光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和萤光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与萤光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带萤光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

4. 应用

D-Luciferin 作为萤光素酶的底物，存在于多种发光生物体中。在ATP和萤光素酶的催化作用下，荧光素被氧化，产生蓝绿色的光(560nm)，当底物过量时，产生的光量子数与萤光素酶的浓度呈正相关。编码萤光素酶的Luc基因是植物、细菌、哺乳动物细胞的常见报告基因。由于没有背景干扰，因此可以很容易检测出低至0.02pg水平的萤光素酶。广泛应用于活体成像报告基因检测等领域。

使用方法（供参考）

1. 活体成像分析方法

（1）用DPBS（w/o Mg2+、Ca2+）配置D-Luciferin工作液（15mg/mL）* ，0.2μm滤膜无菌过滤。

（2）注射量：10μL/g的体重，如10g 重小鼠，注射100μL 工作液（1.5 mg D-Luciferin）。

（3）腹腔注射10～15分钟后，上机进行图像分析。 

2. 体外分析方法

（1）用无菌水配置200× 的D-Luciferin储备液（30mg/mL）*，立即使用，或-20℃保存

（2）用预热好的完全培养基1∶200稀释D-Luciferin储备液，配置工作液（150μg/mL）

（3）去除培养细胞的培养基

（4）进行图像分析前，向细胞中添加1× 的D-Luciferin工作液，进行图像分析

注：1.溶解D-Luciferin时要完全，

2.在图像分析前，将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度

3. 植物活体成像

D-荧光素钾盐、D-PBS（不含钙镁）或PBS

（1）使用无菌D-PBS（w/oCa2+,Mg2+）或PBS配制 D-荧光素钾盐储存液（15mg/mL），0.22µm滤膜过滤除菌，分装后于20℃或-80℃冷冻保存，避免反复冻融。使用时4℃融化，实验前平衡至室温。

（2）建议在实验使用前将D-荧光素钾盐储存液稀释50倍配制成0.3mg/mL的工作溶液待用。

（3）将带有萤光素酶报告基因的菌液进行注射处理，之后继续培养36~48h左右，然后用1mL注射器吸取0.3mg/mL的D-荧光素钾盐注射于烟草叶背面，或者用0.3mg/mL的D-荧光素钾盐直接喷洒在烟草叶片背后。

（4）黑暗条件下静置5min。

（5）剪取烟草叶片放入活体成像仪中，用bioluminescence程序进行发光成像，根据实验结果调整曝光强度并拍照。

注意事项：

1. 保存和操作的过程中都要避光。如果有条件，对储存液充氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间更长。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，仅供客户参考交流研究之用。

4. 我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。