货号：Q2513P

存储条件：4-30℃保存

产品简介

Lablead HP系列离⼦交换介质以⾼刚性琼脂糖为基质，以 Q 为配基，具有粒径小、反压低、分辨率⾼的特点，能很好的⽤于重组蛋⽩、抗体、核酸、病毒及类病毒颗粒、多糖等⽣物分⼦的分离纯化。

产品参数

操作说明

将填料填装到层析柱中，根据样本量和填料载量选择合适的层析柱和柱⾼。

1. 缓冲液准备

具体的缓冲体系应根据⽬标蛋⽩的稳定性和等电点、离⼦交换介质的种类进⾏筛选和优化。

建议使⽤缓冲液：

平衡缓冲液：50 mM Tris-HCl，pH8.0

洗脱缓冲液：50 mM Tris-HCl+1M NaCI，pH8.0

2. 样品准备

为了避免堵塞层析柱，样品应经离⼼或微滤（0.45μm）处理。

3. 样品纯化

1）平衡：⽤ 0.5~1CV 洗脱缓冲液进⾏预平衡，再⽤ 5~10CV 的平衡缓冲液平衡层析柱，⾄流出液电导和pH不变（与平衡液⼀致）；

2）进样：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致；

3）淋洗：继续用平衡缓冲液淋洗至基线；

4）洗脱：可以根据实际情况采取提⾼盐浓度或改变流动相pH的⽅法依次洗脱吸附于层析介质上的样品；

5）再生∶每次层析之后可⽤0.5M~2M NaCl清洗层析柱，除去强结合的蛋⽩；

6）CIP：0.5M NaOH，15min，碱洗后⽤⾼盐迅速将pH冲洗⾄中性，然后⽤纯⽔冲洗掉再保存柱子。

4. 在位清洗及储存

4.1 在位清洗

介质使⽤数次（具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进⾏在位清洗；

1）对于通过离⼦键强结合的蛋⽩，可⽤3CV 2M NaCl 清洗，并⽤ 3 CV 以上的去离⼦⽔清洗；

2) 对沉淀蛋⽩、疏⽔性结合的蛋白、脂蛋白，可⽤ 0.2~0.5M NaOH 清洗（与层析介质接触时间1~2 小时），并用5 CV 以上平衡液和 3 CV 以上的去离子水清洗；

对强疏⽔性结合的蛋⽩、脂蛋⽩和脂类物质，可用5 CV以上的50%⼄醇或 30%异丙醇清洗，6M盐酸胍或者8M尿素清洗，并⽤ 5CV 以上的去离⼦⽔清洗；也可⽤含⾮离⼦表⾯活性剂的碱性或酸性溶液清洗，如⽤ 0.1%〜0.5%的 Triton X-100 + 0.1 M 乙酸清洗1-2小时，并⽤5 CV 以上的 50%⼄醇冲洗去除去污剂，然后⽤ 5 CV 以上的纯⽔冲洗（使⽤⾼浓度的有机溶剂时，为了避免产⽣⽓泡，应采⽤逐步增加有机溶剂浓度的⽅法）。

4.2 储 存

2~30°C下 20% ⼄醇中保存（4°C下有利于⻓期保存）；层析柱中的介质可⽤ 20% 的⼄醇冲洗后保存于 2~30°C。

注：在装柱、使⽤和保存柱⼦的时候，要避免柱⼦流⼲或密封不严，防⽌⽓泡进⼊。