货号：H31050
储存条件：4℃，有效期5年，保护液：20%乙醇，含0.05M乙酸钠
产品说明
Heparin agarose beads 6FF是以高度交联的琼脂糖凝胶为基质，采用环氧活化工艺，对基体的交联进行了优化，使基体具有良好的流动性能和高物理化学稳定性。并采用特殊延长臂和键合技术偶联高纯度肝素钠配基，具有良好的载量和选择性；配基脱落低，非特异性吸附少，配体定向偶联，增强了抗凝血酶!川的结合能力，主要用于乳铁蛋白、凝血酶I、凝血因子、脂蛋白、酯酶、蛋白合成因子、激素、类固醇受体、核酸结合酶和干扰素等的分离纯化。
产品参数
产品名称 | Heparin agarose beads 6FF |
配基 | Heparin Sodium |
基质 | 6%高度交联琼脂糖 |
粒径 | 45um~165um |
配基密度 | 5mg肝素/ml 介质 |
载量/毫升介质 | ＞15mg乳铁蛋白 |
最高流速 | 100~12500px/h（根据柱子规格选择合适流速） |
最大耐压 | 0.3MPa |
pH稳定性 | 4~12(工作)， 4~13（清洗） |
化学稳定性 | 稳定于常用的水缓冲液、0.05M醋酸钠(pH4.0)、20%乙醇、4M氯化钠；8M尿素、6M盐酸胍、0.1M氢氧化钠 |
存储 | 20%乙醇+0.05M乙酸钠溶液2~8°C |
操作说明
Heparin agarose beads 6FF可以在实验室被填装到中压层析柱中，以扩大产量。将填料填装到层析柱中，根据样本量和填料载量选择合适的层析柱和柱高。
1. 缓冲液准备
平衡缓冲液：20~50mM PB或Tris/HCl，pH7.4~8.0，可加入0.15M NaCI抑制非特异吸附。
洗脱缓冲液：20~50mMPB或Tris/HCl+1~2M NaCl，pH7.4~8.0。
2. 样品准备
为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤(0.45um)处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
3. 样品纯化
3.1 平衡：用5~10CV的平衡缓冲液平衡层析柱，至流出液电导和PH不变(与平衡液一致)。
3.2 进料：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。
3.3 淋洗：上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
3.4 洗脱：用洗脱缓冲液(NaCI浓度需要根据目标蛋白的结合力进行适当调整)洗脱，收集流出液。可采用线性梯度或阶越式梯度洗脱。
3.5 再生：用平衡液冲洗5~10 CV，然后用纯水冲洗5~10CV，再用20%乙醇冲洗2~3CV，置于2~8°C保存。
重要提示：如果使用中压预装柱，可省略装柱步骤。
在位清洗及储存
1. 在位清洗
为了避免不同样品间的相互干扰，或者当介质污染比较严重时(反压增加)，需要对介质进行在位清洗。
1.1 对于以离子键结合的蛋白，可用2~3CV以上的2M NaCI清洗，并用3CV以上的纯水冲洗。
1.2 对沉淀或变性蛋白，可用0.1M NaOH清洗(1~2h)，并用3~10CV平衡液和3CV以上的纯水冲洗。也可用6M
Gua-HCl或8Murea清洗(0.5~1h)。
1.3 对疏水性结合的蛋白，可用0.1~0.5%的非离子去污剂清洗(1~2h)，并用3~10CV的纯水冲洗。
注意事项：在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。
