产品货号：B2884
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产品描述
Hoechst 33258是可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂，在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258-DNA 的激发和发射波长分别为 350nm 和 460nm。
产品性质
中文别名（Chinese Synonym） | 二苯甲亚胺, 三氯化氢 2'-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑 |
英文别名（English synonym） | 2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2, 5’-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride， Hoechst 33258，bisBenzimide H 33258，HOE 33258 Benzimide H 33258 或 HOE 33258 |
CAS号（CAS NO.） | 23491-45-4 |
分子式（Formula） | C25H24N6O · 3HCl |
分子量（Molecular weight） | 533.88 |
外观（Appearance） | ⻩色粉末 |
纯度（Purity） | ≥99%（HPLC）超纯级 |
结构式（Structure) | |
使用方法
1、对于固定的细胞或组织：
1)对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
2)对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，并混匀。室温放置 3-5 min。
3)吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS 或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5min。
4)直接在荧光显微镜下或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
2、对于活细胞或组织：
5)加入适当量Hoechst 33258染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1ml 染色液，对于96孔板一个孔需加入100ul染色液。
6)在适宜于细胞培养的温度培养20-30min。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
注意事项
1)Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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