货号：P0065/P0085/P0105/P0125/P0155
存储条件：促凝剂，-30~-15℃保存，≤0℃运输，可在2~8℃保存至少3个月；其他组分，2~8℃保存。
产品简介：
一步法SDS-PAGE AB液蛋白快速制胶试剂盒适用于蛋白聚丙烯酰胺凝胶的快速制备。本试剂盒采用上层胶和下层胶的预混配方，只需将试剂两两混合，加入促凝剂即可凝胶，简便快捷。所配的上层胶带有颜色，方便点样和区分不同凝胶。试剂盒提供的改良型促凝剂，具有良好的稳定性和促凝效果，配胶过程中无需添加TEMED。本试剂盒可配制125 块mini PAGE胶(以0.75mm厚度胶计算)。
产品组分
组分 | 货号 | 规格 |
上层胶 A液 | P0105-1 | 80ml |
上层胶B液 | P0105-2 | 80ml |
下层胶A液（6%、8%、10%、12%、15%） | P0065-3、P0085-3、P0105-3、P0125-3、P0155-3 | 250ml |
下层胶B液 | P0105-4 | 250ml |
改良型促凝剂 | P0105-5 | 8ml |
凝胶浓度选择参照
货号 | 试剂盒浓度 | 蛋白最佳分离范围 |
P0065 | 6% | 50-150KD |
P0085 | 8% | 30-130KD |
P0105 | 10% | 20-100KD |
P0125 | 12% | 10-70KD |
P0155 | 15% | 10-55KD |
操作流程：
以制备一块0.75/1.0/1.5 mm的PAGE胶为例。
下层胶配方
凝胶厚度 | 下层胶 A液 | 下层胶 B液 | 促凝剂 |
0.75mm | 2.0ml | 2.0ml | 40ul |
1.0mm | 2.7ml | 2.7ml | 60ul |
1.5mm | 4.0ml | 4.0ml | 80ul |
上层胶配方
凝胶厚度 | 上层胶 A液 | 上层胶 B液 | 促凝剂 |
0.75mm | 0.5ml | 0.5ml | 10ul |
1.0mm | 0.75ml | 0.75ml | 15ul |
1.5mm | 1.0ml | 1.0ml | 20ul |
1. 各组分在使用前请颠倒混匀6-8次。
2. 下层胶配制：取等体积下层胶A液和下层胶B液，各2.0/2.7/4.0 ml，混匀。
3. 上层胶配制：取等体积上层胶A液和上层胶B液，各0.5/0.75/1.0 ml，混匀。
4. 向步骤2的混合溶液中加入40/60/80 μl的促凝剂，立即充分混匀，然后注入制胶玻璃板中，使液面距短玻璃板上沿约37.5px。
注1：此溶液一般过量，请勿全部注入。
注2：混匀操作避免剧烈振荡，在灌注的过程中避免将气泡灌入制胶玻璃板中。
注3：灌注下层胶后用ddH2O或乙醇封闭，待下层胶凝固后再灌注上层胶。
5. 向步骤3的混合溶液中加入10/15/20μl的促凝剂，立即充分混匀，等下层胶凝固后再加入上层胶（也可无需等待下层胶凝固），将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中，轻轻插入梳齿。
注：如下层胶未凝固，灌注上层胶溶液可沿着长玻璃板轻缓注入，避免将下层胶冲散。
6. 待胶凝固后(室温约20-30 min)，拔去梳齿即可用于电泳。
注：请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
注意事项：
1. 促凝剂需要根据温度来调整用量，气温偏低时可以增加用量，气温偏高时可以减少用量。
2. 建议的电泳条件：80V跑浓缩胶，120V跑分离胶；或全程用260V（小于300V）电压。
