货号:DBMK02
保存:-20℃保存。
规格:40μ/条带(约40次)
分子量范围:14,400~97,400道尔顿。
有效期: 2年
成 分 | 电泳图谱 | 含量(μg/支) |
兔磷酸化酶B(Rabbit Phosphorglase B) |
| 40 |
牛血清白蛋白 (Bovine Serum Albumin) | 40 | |
兔肌动蛋白(Rabbit Actin) | 40 | |
牛碳酸酐(Bovine Carbonic Anhydrase) | 40 | |
胰蛋白酶抑制剂(Trypsin Inhibitor) | 40 | |
鸡蛋清溶菌(Hen Egg White Lysozyme) | 40 |
使用方法:使用时直接取本产品5ul进行SDS-PAGE电泳。用考马斯亮蓝R-250 或G250(Coomassie Blue R-250 or G-250 )染色,可得清晰、密度均匀的6个蛋白质条带。
注意事项:如出现带型缺失现象或样品聚集在分离胶上沿,可在Marker中加入终浓度为50mM的DTT,95℃处理5分钟后再上样。
建议使用分离胶:12-15%(T)。
2倍样品缓冲液配制:
试剂名称 | 成分 | 含量/浓度 | 配制方法 |
2倍样品 缓冲液 | 0.5M Tris-HCl,pH6.8 | 2.0ml | 以上溶液混合后加双蒸水2.5ml至10.0ml。可适当调整溴酚蓝的用量以保证电泳时的最佳指示。 |
丙三醇(甘油) | 2.0ml | ||
20% SDS | 2.0ml | ||
0.1%(w/v)溴酚蓝 | 0.5ml | ||
β-巯基乙醇 | 1.0ml |
Regents for SDS Gels:
A. 4× Lower gel buffer pH8.8 1.5 M Tris 90.83g 0.4% (w/v) SDS 2.00g dd H2O to 500ml 用浓 HCl调pH至8.8 | B. 4 × Upper gel buffer pH6.8 0.5 M Tris 12.11g 0.4% (w/v) SDS 0.8g dd H2O to 200ml 用浓 HCl调pH至6.8 |
C. 30% Acrylamide regμlar 29.2% (w/v) acrylamide 29.2g 0.8% (w/v) Bis-acrylamide 0.8g dd H2O to 100ml 加热使acrylamide完全溶解,冷却后加Bis, 混合溶解后定容,用滤纸过滤,装棕色瓶 | D. 10 × Running buffer 0.25 M Tris 30.3g 1.92 M Gly 144.1g 1.0% (w/v) SDS 10.0g dd H2O to 1000ml (无需调pH) pH即为8.2-8.3 |
分离胶 总体积12ml 单位:ml 浓缩胶
5% | 7% | 10% | 11.5% | 12% | 13.5% | 14% | 15% | 5% | ||
dd H2O | 7 | 6.2 | 5 | 4.4 | 4.2 | 3.6 | 3.4 | 3 | dd H2O | 4.06 |
4 × lower | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 4 × up | 1.68 |
30%Acr | 2 | 2.8 | 4 | 4.6 | 4.8 | 5.4 | 5.6 | 6 | 30%Acr | 1 |
100%TEMED | 10μl | 10μl | 10μl | 10μl | 10μl | 10μl | 10μl | 10μl | 100%TEMED | 5μl |