货号：DBMK01
保存：-20℃保存。 有效期2年
产品说明：
SDS-PAGE超低分子量标准品用来测定SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量，该产品由三种多肽和两种低分子量蛋白质组成，分子量范围3, 313-20,100道尔顿。
规格：本品经Tricine-甘油SDS-PAGE电泳后，用考马斯亮蓝G-250染色可获得清晰的条带。
组成及电泳图
使用方法：使用前置室温融化后取5μL上样。
聚丙烯酰胺凝胶制备
分离胶 | 夹层胶 | 浓缩胶 | |||
20%/4.5 ml | 16.5%/4.5 ml | 15.5%/4.5 ml | 10％/2 ml | 4％/2 ml | |
49.5%T 3%C | / | / | / | 0.407 ml | 0.160 ml |
49.5%T 6%C | 1.82 ml | 1.50 ml | 1.395 ml | / | / |
凝胶缓冲液 | 1.50 ml | 1.50 ml | 1.50 ml | 0.667 ml | 0.496 ml |
甘油 | 0.48 ml | 0.48 ml | 0.48 ml | / | / |
ddH2O | 0.70 ml | 1.02 ml | 1.125 ml | 0.926 ml | 1.344 ml |
10%AP | 40 μl | 40 μl | 40 μl | 20 μl | 20 μl |
TEMED | 5 μl | 5 μl | 5 μl | 3 μl | 3 μl |
先制备分离胶，聚合后,再制备夹层胶，最后制备浓缩胶.三种胶长度比例4:1.5:1。
电压: 30 V 1小时
100 V 至结束
电泳之后将胶在固定液中固定20分钟(可选择)，再进行染色，一般染色20－30分钟，即可脱色。
使用者注意事项:
1. 超低分子量多肽的SDS-PAGE制备和操作远较常规的SDS-PAGE方法复杂,初学者一开始可能结果不理想，但经一二次操作后，可获得理想结果。
2. 由于多肽所含的氨基酸数目较少，因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性)，则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率，即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
3. 由于SDS-PAGE的图谱上，蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000，因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量，只能根据标准分子量进行估计，推断其是否落入预测的分子量范围。
4. 由于超低分子量多肽（3000及3000以下），极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长，脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久，否则条带会消失。
