产品货号：Y0003
储存条件：常温干燥保存
产品描述
用 LiAc 转化法进行酵母转化时，通常会通过加入 Carrier DNA，选用对数期的酵母菌，以及优化质粒DNA 的质量和浓度等方法来提高转化效率。在完成转化操作后，将转化产物用YPD Plus液体培养基重悬培养 30-60 分钟，有助于酵母细胞从热激中复苏，可以有效提高转化效率 50-100%。适用于转化酵母菌株Y2H Gold、AH109 或 Y187 等，尤其适合对转化效率要求更高的文库转化。
使用说明（以经典转化方法为例）
YPD Plus液体培养基的配制
1. 取50 g的YPD Plus加入到1 L的去离子水中加热溶解。
2. 121℃高压灭菌15分钟，冷却至室温后用于后续转化实验。
质粒转化：
1. 在含有约 1 μg 质粒的 1.5 mL 无菌离心管中加入5 μL预变性的Carrier DNA，50 μL酵母感受态细胞，350 μL LiAc / PEG3350 混合液轻柔混匀。
2. 30℃水浴或者金属浴 30 min，每 10 min 轻柔上下颠倒混匀一次。
3. 每管加入 20 μL DMSO，轻柔上下颠倒混匀。
4. 42℃水浴热激 15 min，每 5 min 轻柔上下颠倒混匀一次。
5. 1000 g 离心 5 min，弃掉上清。
6. 菌体沉淀用 1 mL YPD Plus 液体培养基重新悬浮，30℃摇床震荡培养30-60 min。
7. 1000 g 离心 5 min，弃掉上清，加入 1 mL 无菌 0.9% NaCl 重悬菌体。
8. 分别稀释 10 倍，100 倍后涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
9. 平板倒置于培养箱中30℃恒温培养 3-5 天。
文库转化：
1. 在含有约5-15 μg 文库质粒的 15 mL 无菌离心管中，加入 20 μL 预变性的Carrier DNA，600 μL酵母感受态细胞，2.5 mL LiAc / PEG3350 混合液轻柔混匀。
2. 30℃水浴 45 min，每 10 min 轻柔上下颠倒混匀一次。
3. 每管加入 160 μL DMSO，轻柔上下颠倒混匀。
4. 42℃水浴热激 20 min，每 5 min 轻柔上下颠倒混匀一次。
5. 1000 g 离心 5 min，弃掉上清。
6. 菌体沉淀用 3 mL YPD Plus 液体培养基重新悬浮，30℃摇床震荡培养90 min。
7. 1000 g 离心 5 min，弃掉上清，根据实验需求加入相应体积的无菌 0.9% NaCl 重悬菌体。
8. 涂布于相应的缺陷型培养基平板上，将平板倒置于培养箱中30℃恒温培养 3-5 天。
注意事项
1. 本品出现结块请勿使用。
2. 本产品仅作科研用途，不得用于临床诊断或治疗。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
