产品货号：G10250-100ml
储存条件：20%的乙醇溶液室温保存
1. 产品简介
Chrom G25系列介质是以葡聚糖为基质的凝胶过滤层析介质，具有极高的选择性，其工作原理主要是利用具有网状结构的葡聚糖疑胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离，粒径大小和孔径大小是控制先后流出的关键因素。
层析时，大于凝胶孔径的大分子，被阻于凝胶相外，沿着凝胶颗粒之间的间隙走，下移速度最快，故最先洗脱下来，中分子物质部分进入凝胶内部，洗脱速度为其次，而小分子物质因全部进入凝胶内部，受到阻力最大，故最后被洗脱下来，如此物质得到分离。广泛应用于缓冲体系的置换、脱盐、小分子物质的去除以及不同分子量物质的分离等工业领域中。
特点：具有极高的选择性;多种分离范围，颗粒大小可选择。
2. 技术指标
产品名称 | Chrom G25 M |
颗粒大小(um) | 50~150 |
分离范围(葡聚糖) | 1X102~5x103 |
分离范围(球蛋白) | 1X102~5x103 |
溶胀因子(mL/g) | 4~6 |
最大流速(cm/h) | 100 |
pH稳定性 | 2~13 |
化学灭菌 | 121℃,30min pH 7.0 |
3操作说明
3.1 凝胶的预处理
Chrom G25系列如为干粉状态，初次使用前必须进行预处理。溶胀过程中严禁使用磁力搅拌，以免使微球破碎。加入⾜够的水或缓冲液进行溶胀，室温3h以上或水浴90℃ 1h 。如果室温溶胀则需要进行真空脱气，然后将溶胀好的微球按照 3:1（v/v）加入水或者缓冲液搅拌使其形成均匀的75%胶悬液。
如果是液体保存或重复使⽤的可以将20%乙醇倾去，加水或缓和液搅拌均匀成75%的胶悬液。
3.2 层析柱装柱
Chrom G25可以在实验室被填装到中压层析柱中，以扩大产量。将填料填装到层析柱中，根据填料不同的用途来选择合适的层析柱和柱⾼。
3.3 纯化流程
缓冲液准备：⽬的缓冲液。
1)平衡：
用缓冲液平衡脱盐柱5~10CV。
2)进样：
建议上样量小于10% 柱体积，脱盐时最大样品量可达30% 柱体积。为了延长填料的使⽤寿命，所⽤的样品推荐使用0.45 μm的滤膜过滤。
3) 洗脱：
样品洗脱过程中使用的流速不要超过推荐的最大流速。凝胶过滤是一种非吸附性色谱技术，所有的样品物质都应在一个柱体积内洗脱出来。完成一个操作后，如仍用同一种缓冲液，色谱柱不需要再平衡。
3.4 原位清洗及保存
1）原位清洗：
为除去变性蛋白或脂肪，有时需要对脱盐柱进行原位清洗。常用的洗脱液为0.2MNaOH或非离子型去垢剂。可用一倍
的柱体积清洗。
2）保 存：
20%的乙醇溶液室温保存。
Chrom G25 M纯化Protein A+NaCl ⾊谱曲线图
介质:Chrom G25M
柱高:250px
样品:ProteinA+NaCl
上样量0.4mL
平衡缓冲液:超纯水
流速:0.4mL / min
