产品货号：T0204

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产品描述

Taq-ASPCRMix的浓度为2×,使用方便快捷，能减少PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2×Taq-AS PCR Mix，加入模板和引物，并加ddH2O补足体积，使反应体系浓度为1×，即可进行PCR反应。PCR产物3'端带突出A碱基，纯化后可直接用于T/A克隆。

该Mix中的TaqDNA聚合酶为筛选获得的Taq-AS(Advanced Strong)DNA Polymerase突变体，能够高效扩增≤5kb的DNA片段，具有良好抑制剂耐受能力，其扩增速度约为普通Taq DNA聚合酶3倍，因此可大幅度减少PCR延伸过程所需要的时间，达到缩短整个PCR反应的目的。不同于融合蛋白原理的快速Taq聚合酶，Taq-AS的使用更加接近WT-Taq，不易出现电泳条带弥散、拖带或者片段大小改变等状况。

质量控制

核酸内切酶活性检测

将25μl 2×Taq-AS PCR Mix与200ng超螺旋质粒DNA配制成50μl反应体系，在37℃下，共同温育4h后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于10%的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。

非特异性核酸酶活性检测

将25μl 2×Taq-AS PCR Mix与15ng双链DNA片段配制成50μl反应体系，在37℃下温育16h，使用琼脂糖凝胶电泳检测双链DNA底物无变化。

使用方法

1.常规PCR反应体系(冰上操作)

a.需融解完全后使用，防止离子浓度不均匀;

b.引物推荐终浓度为0.2~0.4μM，效果不佳时可以在0.1~1μM浓度范围内进行调整；

c.不同模板最佳反应浓度有所不同，以50μl体系为例：模板为基因组DNA时，一般推荐的使用量为10~400ng；当模板为质粒或病毒DNA时，一般推荐的使用量为10pg~20ng。 

2.三步法PCR反应程序

3.二步法PCR反应程序（目的片段≥3kb）

d.菌落PCR时预变性≥5min，更有利于破壁。