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  • 线性PEI转染试剂(Mw 40,000,1mg/ml)(货号:P4001)
  • 线性PEI转染试剂(Mw 40,000,1mg/ml)(货号:P4001)

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    • 试剂规格:
    • 1ml
CAS:
-

货号:P4001

存储条件储存液 在4 ºC保存,有效期至少3个月。

 

产品简介

Polyethylenimine Linear(PEI)溶液,浓度为1mg/ml,是由一种阳离子聚合物转染试剂,分子量40000,它能与核酸形成复合物,并使该复合物进入哺乳动物细胞。线性PEI转染试剂适用广泛。该试剂可在含血清与抗生素的完全培养基中发挥作用,即使在有血清存在的情况下,它仍然能高效的将核酸导入细胞。实验操作简单,对大多数培养细胞都有较高的转染效率(用于常见细胞系,如HEK-293、HEK293T、Hep G2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等),并且细胞毒性较低。 

 

操作流程(以6孔板为例)

1.细胞铺板

提前一天将细胞种植在六孔板中,以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

2.转染过程

1)在转染前2h,移除细胞上原有的培养基,换为新鲜的完全培养基。

2)将2ug质粒DNA用50uL无血清稀释液稀释,充分混匀制成DNA稀释液。

注意:无血清稀释液建议采用Opti-MEM或ddH2O

3)向DNA稀释液中直接加入4uL转染试剂,室温静置10~15min。转染复合物配制完成。

4)将转染复合物加入细胞培养基中,轻柔混匀。

5)继续培养24~48h,收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆。

6)使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期,36~48h达到表达高峰,相对于脂质体转染试剂,达到峰值的时间延后约6~12h。

 

不同细胞培养容器转染用量:

细胞培养容器

表面积

稀释液体积

DNA的量

转染试剂的量

培养基总量

96-well

7.5px2

10uL

0.1ug

0.1uL

100uL

48-well

17.5px2

20uL

0.2ug

0.3uL

200uL

24-well

47.5px2

50uL

0.5ug

1uL

500uL

12-well

95px2

50uL

1ug

2uL

1mL

6-well/35mmdish

250px2

100uL

2ug

4uL

2mL

60mm dish/T25flask

525px2

200uL

4ug

8uL

4mL

100mm dish/T75flask

1450px2

500uL

10ug

20uL

10mL


 

注意事项

1、对大多数细胞来而言,每1μg DNA 使用3.0μL PEI MAX转染试剂都能获得较高转染效率。也可尝试每1μg DNA使用 1.5~4 μL体积线性PEI 40000转染试剂进行优化。

2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。

3、本产品仅用于科研用途,不可用于人体。

 

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