货号：P3250-1
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产品描述
木瓜蛋白酶（Papain），一种半胱氨酸蛋白酶，具有广泛且特异的切割活性。包含肽链内切酶活性，可裂解碱性氨基酸、亮氨酸或甘氨酸肽键；还具有酰胺酶以及酯酶活性。该酶由单一肽链组成，包含3个二硫键和1个维持酶活性的巯基基团，其活性位点包含7个亚单位（S1-S4和S1’-S3’），其中每个亚单位可容纳底物1个氨基酸残基。其活性主要由S2亚单位控制，该单位为可容纳底物分子P2侧链的疏水区，Papain特异性主要决定于位于该疏水区的疏水氨基酸或芳香族氨基酸残基。
木瓜乳液至少富含4种半胱氨酸内肽酶，包括木瓜酶、木瓜凝乳蛋白酶、氨基乙酰基肽链内切酶和木瓜蛋白酶Ω等。存在于乳汁细胞中的内肽酶处于非活化状态，但是一旦从乳汁细胞中分泌出来则迅速转化为活性状态。木瓜蛋白酶在上述内肽酶中含量很少，但是该酶易于分离纯化，研究的也最多。在生化研究中具有多种应用：1）在某些组织的水解过程中，木瓜蛋白酶比其他蛋白酶作用效果更好，但破坏性更低，常用于原代或神经元细胞解离，例如，木瓜蛋白酶可从产后小鼠中分离具有活力和完整细胞形态的皮质神经元、平滑肌细胞等。其研究表明，该酶分离得到的平滑肌细胞对兴奋刺激的敏感性不受影响；2）用于某些蛋白质或酶的结构研究；3）用于红细胞血清学修饰红细胞表面以增强或破坏一些红细胞表面抗原的反应性；4）用于血小板血清学；5）用于氨基酸、多肽、其他分子的酶促合成；6）从IgG和IgM中制备抗体Fab 片段；7）完整膜蛋白酶的溶解；8）用于从纯化的蛋白多糖内生产糖蛋白。
本品为经两次结晶悬液制备得到的冻干粉末，来源于番木瓜乳液（Carica papaya latex），比活力≥15 units/mg protein。
说明：生化研究,用于抗体Fab片段的制备以及细胞分离。
性状：为乳白色至微黄色粉末，具有木瓜特有的气味,稍具有吸湿性。水解蛋白质能力强,但几乎不能分解蛋白胨，易溶于水,甘油,不溶于一般的有机溶剂,耐热性强
酶活力定义：紫外光分光度法：在测定条件（37±0.2℃；PH值7.0）每分钟水解酪蛋白释出的三氯乙酸可溶物在275nm波长有吸光度与1微克酪氨酸的吸光度相当时，所需的酶量即为一个活力单位，用u/g表示。一种能水解多肽、酰胺和酯的酶。其分子由212残基的折叠多肽键组成。微有吸湿性。对光敏感。不完全的溶于水和甘油，几乎不溶于多数有机溶剂。酶反应：裂解Arg-、Lys-、Phe-、X氨基酸。模型底物为苯甲酰精氨酸乙酯(BAEE)、N-苯甲酰-L-精氨酸对硝基苯胺(N-α-Bz-L-Arg-4-NA）、苄氧羰酰缬氨酰甘氨酰精氨酸对硝基苯胺(Chromozym TRY)。激活剂有半胱氨酸(Cys)、谷胱甘肽(GSH)、EDTA、还原剂、氰化物。抑制剂有汞(Hg2+)、其他重金属、碘乙酸、N-对基顺丁烯二，酶活：80万U/g
产品性质
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英文别名（English Synonym） | Papainase, papaya peptidase I |
CAS号（CAS NO.） | 9001-73-4 |
分子量（Molecular Weight） | 23.4 kDa (Theoretical) |
等电点（Isoelectric point,pI） | 8.88 (Theoretical) |
活性位点（Active Site Residues） | Cysteine (C158)；Histidine (H292)；Asparagine (N308) |
激活剂（Activators） | Cysteine; Sulfide and sulfite; N-bromosuccinimide; Heavy metal chelating agents like EDTA; |
抑制剂（Inhibitors） | PMSF; TLCK, TPCK; alph2-macroglobulin; AEBSF; Antipain; Hg2+ andother heavy metals; cystatin; E-64; Leupeptin; Sulfhydryl binding agents; Carbonyl reagents; Alkylating agents |
稳定剂（Stabilizing agents） | EDTA, cysteine, dimercaptoethanol |
比活力（Activity） | ≥15 units/mg protein |
单位定义（Unit definition） | One Unit hydrolyzes one micromole of benzoyl-L-arginine ethyl ester per minute at 25℃, pH 6.2, after activation in a solution containing 1.1 mM EDTA, 0.067 mM mercaptoethanol and 5.5 mM cysteine-HCl for 30 minutes. |
最佳pH范围（Optimum pH） | 6.0-7.0 |
消光系数（Extinction Coefficient） | 53,610 cm-1 M-1 (Theoretical) E1%, 280 = 22.88 (Theoretical) |
注意事项
1）为保证得到完全活性的木瓜蛋白酶，该酶需在酶活化缓冲液（含1.1 mM EDTA，0.067 mM mercaptoethanol和5.5 mM cysteine-HCl）中孵育30 min。建议使用前用0.22 μm滤膜过滤。
2）制备好的木瓜蛋白酶悬液放到4℃保存，不可冻存。
3）含有NaCl的木瓜蛋白酶悬液4℃保存约可稳定保存几个月，没有明显的酶活力丧失。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5）本产品仅作科研用途！
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