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  • 基质胶-标准型无酚红(货号:MG6237-1)
  • 基质胶-标准型无酚红(货号:MG6237-1)

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CAS:
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货号:MG2237、MG4237、MG6237

存储条件-80 保存,避免反复冻融。

 

产品简介

基质胶是从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤提取的可溶性细胞培养基质,含有丰富的细胞外基质蛋白,主要包括层粘连蛋白、胶原IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及大量的生长因子。

基底胶在室温条件下,聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化,以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。基质胶也适用于类器官生长、分化、代谢和毒理学研究。高浓度的基质胶可以用于动物体内成瘤实验的细胞包被。

 

操作方法:

一、薄胶成胶方法:

1. 冻融后,用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。

2. 将需要使用的培养板置于冰上,加入浓度为 50μL/cm2生长面积的基质胶。

3. 在 37℃放置 30 分钟,即可使用。


二、厚胶成胶方法:

1. 冻融后,用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。

2. 将需要使用的培养板置于冰浴,将培养的细胞与基质胶混合,用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为 150-200μL/cm2 生长面积的基质胶。

3. 在 37℃放置 30 分钟,可成胶。可以加入细胞培养的基质,也可使细胞直接生长在胶表面。


三、薄层包被方法:

1. 冻融后,用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。

2. 根据使用需要,采用无血清培养基稀释基质胶。根据实验需要确定最佳包被浓度。

3. 将稀释的 基质胶包被于所需的培养器皿中,包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育 1 小时。

4. 去除未结合的基质胶,用无血清培养基轻轻地冲洗。


四、类器官培养方法:

1. 用适量的4℃过夜解冻的基质胶重悬细胞或组织沉淀,推荐重悬密度为每50μL基质胶悬液包含1X10^5细胞,重悬后可置于冰上,重悬时间不超过30s以避免基质胶过早凝固。基质胶稀释比例应在70%以上以保证培养过程中基质胶的结构稳定性。

2. 将基质胶和组织细胞的混合悬液点入预热的24孔板底部正中央,每孔30μL左右,避免悬液接触孔板侧壁。为防止基质胶室温凝固,此步骤应尽快完成。

3. 将接种完成后的培养板至于 37℃二氧化碳恒温培养箱中,孵育 15min 左右待基质胶凝固。

4. 待基质胶完全凝固后,沿壁缓慢加入类器官培养基,24孔板每孔 500uL,避免破坏已凝固结构。

5. 24孔板置于37℃二氧化碳培养箱中培养。 

6.  3 天更换一次培养基,更换培养基时应避免破坏基质胶。

 

注意事项:

1. 收到产品并确认到货情况无异常后,请将 基质胶储存于--80℃冰箱,短暂使用可置于--20℃冰箱。切勿将基质胶储存于自动除霜的冰箱中。在第一次融化后请分装保存,应避免基质胶反复冻融。

2. 因基质胶在 10℃以上即可成胶,在操作过程中,保持基质胶一直置于冰上,所有接触的细胞培养器皿,移液吸头,分装管等都必须预冷后使用。

3. 所有操作均需在无菌环境下进行,试剂瓶瓶盖可用 70%乙醇擦拭,并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证基质胶呈匀浆状。

4. 溶解时可将基质胶基质置于 4℃冰箱内冰上过夜溶解。成胶后基质胶可以在 4℃ 24-48 小时后重新呈液态。


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