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  • IPTG溶液(50mg/ml)(货号:I5005)
  • IPTG溶液(50mg/ml)(货号:I5005)

    CAS:367-93-1


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CAS:

CAS:367-93-1



产品货号:I5005

存储条件:-20℃避光保存。有效期2年

产品说明

IPTG为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体Lac操纵子 DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。IPTG也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。

此产品为IPTG用双蒸水溶解过滤后配成的无菌溶液。

使用说明

蛋白表达诱导:50mg/mL浓度为210mM。如果终浓度要求为0.5mM,则每升培养基中加入2.38mL IPTG溶液(50mg/mL)。如果实验中需要使用其他诱导浓度,可自行计算加入量。

蓝白斑筛选:

(1)在100mL的琼脂培养基中,加入500μL的X-gal溶液(20mg/mL)、250μL 的IPTG溶液(50mg/mL)和100μL的Amp(氨苄青霉素,100 mg/mL),制作成含X-Gal、IPTG 和Amp平板培养基。高压灭菌后的培养基需冷却至 55℃以下时加入 X-Gal、IPTG 和 Amp,以防失活。

(2)实际上 X-gal 和 IPTG可以直接涂抹在平板培养基表面, 90mm的平板,X-gal(20mg/mL)涂40μL,IPTG(50mg/mL)涂16μL。150mm的平板加倍使用量,待涂布的液体干后就可以使用。细菌铺板后,37℃培养过夜,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有 DNA 插入片段的基因重组体)。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅用于科研实验。

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