货号：DH0050

存储条件：-85 ~ -65℃保存，干冰运输。

产品说明：

DH5α菌株是实验室最常用的感受态细胞。缺失核酸内切酶(endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA)减少了插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性；lacZΔM15的存在使DH5α可用于蓝白斑筛选。本公司DH5α感受态细胞经过特殊工艺制作，使用pUC19质粒DNA检测，转化效率≥108cfu/μg。

基因型

F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA

实验流程

1. 将感受态细胞从-70℃拿出，迅速置于冰上融化。

2. 将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中，轻弹管壁混匀(避免用枪吸打)，冰上静置30 min。

3. 42℃水浴热激45 sec后，迅速置于冰上静置2 min，切勿摇动离心管。

4. 向离心管中加入900 μl LB或SOC液体培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃，200 rpm摇床中复苏1 h。

5. 5,000 rpm(2,500 × g)，离心3 min，弃掉900 μl上清，用剩余培养基将菌体重悬后，均匀涂布在含相应抗生素的LB固体培养基平板上。

6. 将平板正置于37℃培养箱10 min，待菌液被完全吸收后，倒置平板，过夜培养。

注意事项：

1. 受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用，长时间放置会降低转化效率。

2. 待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。

3. 加入质粒或连接产物后，请勿用移液枪吸打，轻弹混匀即可。

4. 避免将感受态细胞反复冻融。