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  • LabHot Taq DNA Ploymerase(货号:HT0201)
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CAS:
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货号:HT0201

储存温度:-20℃,浓度5U/ul。

 

产品组成、浓度

目录编号

HT0201-500U

HT0201-2500U

LabHot Taq DNA Ploymerase

500U

2500U

10xLabHot TaqBuffer+

1ml

5*1ml

 

产品介绍

LabHot Taq DNA Ploymerase采用了国际上最新的合成亲和性配体技术,该配体技术可以以一种依赖性的方式可逆性的阻断酶的活性。该酶与一般热启动酶的不同之处是,一般热启动酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性。而LabHot Taq DNA Ploymerase利用抑制性配体通过温度调节方式封闭LabHot Taq DNA Ploymerase的底物结合位点,温度低于40°C时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异扩增产物产生,大大提高了PCR反应的精确性。PCR产物3’端为A,可直接用TA载体克隆。

适用范围

一般用于高灵敏度和有较强背景的基因组扩增(如基因组中某个特定基因位点或外源病原体检测)、DNA序列测定、Multiplex PCR、TA克隆等。

酶活性单位

1单位(U)LabHot Taq DNA Ploymerase活性定义为在74°C、30min内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制

SDS-PAGE检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性:PCR方法检测无宿主核酸残留,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。

 

产品特点

快速,不需要额外加热激活。

持续退火时酶活性控制,达到全程热启动效果。

PCR过程无变性抗体等蛋白污染。

 

适用范围

一般用于高灵敏度和有较强背景的基因组扩增(如基因组中某个特定基因位点或外源病原体检测)、DNA序列测定、Multiplex PCR、TA克隆等。 

 

 

建议循环条件(PCR反应循环的设置(扩增人类基因组1kb目标基因举例)

温度

时间

循环数目

94℃

2-3min

1

94℃

30sec

30-33cycles

55℃

30sec

72℃

1min

72℃

10min

 

反应举例:

以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定最佳反应条件。10XLabHot Taq Buffer 中含有Mg2+,配有浓度为15 mM MgC12。实际PCR反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+,设置最佳的反应体系。

 

(以50μl反应体系为例)

Template

<0.5 μg

Forward Primer(10μM)

1μl

Reverse Primer(10μM)

1μl

10X Buffer (with mgcl2)

5μl

dNTP Mixture (2.5mM each)

4μl

Taq DNA polymerase(5U/μl)

0.5μl(0.25~1μl)

dH2O

Final volume to 50 μl

 

 


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