货号:HT0201
储存温度:-20℃,浓度5U/ul。
产品组成、浓度
目录编号 | HT0201-500U | HT0201-2500U |
LabHot Taq DNA Ploymerase | 500U | 2500U |
10xLabHot TaqBuffer+ | 1ml | 5*1ml |
产品介绍
LabHot Taq DNA Ploymerase采用了国际上最新的合成亲和性配体技术,该配体技术可以以一种依赖性的方式可逆性的阻断酶的活性。该酶与一般热启动酶的不同之处是,一般热启动酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性。而LabHot Taq DNA Ploymerase利用抑制性配体通过温度调节方式封闭LabHot Taq DNA Ploymerase的底物结合位点,温度低于40°C时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异扩增产物产生,大大提高了PCR反应的精确性。PCR产物3’端为A,可直接用TA载体克隆。
适用范围
一般用于高灵敏度和有较强背景的基因组扩增(如基因组中某个特定基因位点或外源病原体检测)、DNA序列测定、Multiplex PCR、TA克隆等。
酶活性单位
1单位(U)LabHot Taq DNA Ploymerase活性定义为在74°C、30min内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制
SDS-PAGE检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性:PCR方法检测无宿主核酸残留,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
产品特点
快速,不需要额外加热激活。
持续退火时酶活性控制,达到全程热启动效果。
PCR过程无变性抗体等蛋白污染。
适用范围
一般用于高灵敏度和有较强背景的基因组扩增(如基因组中某个特定基因位点或外源病原体检测)、DNA序列测定、Multiplex PCR、TA克隆等。
建议循环条件(PCR反应循环的设置(扩增人类基因组1kb目标基因举例)
温度 | 时间 | 循环数目 |
94℃ | 2-3min | 1 |
94℃ | 30sec | 30-33cycles |
55℃ | 30sec | |
72℃ | 1min | |
72℃ | 10min |
反应举例:
以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定最佳反应条件。10XLabHot Taq Buffer 中含有Mg2+,配有浓度为15 mM MgC12。实际PCR反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+,设置最佳的反应体系。
(以50μl反应体系为例) | |
Template | <0.5 μg |
Forward Primer(10μM) | 1μl |
Reverse Primer(10μM) | 1μl |
10X Buffer (with mgcl2) | 5μl |
dNTP Mixture (2.5mM each) | 4μl |
Taq DNA polymerase(5U/μl) | 0.5μl(0.25~1μl) |
dH2O | Final volume to 50 μl |