货号 ：D0038-100T
存储条件 ：4℃避光保存 ，有效期见外包装。长期保存可以储存在-20℃。
产品组分
组分 | D0038S(100T) | D0038L(500T) | 浓度 | 储存 |
A. Lab-Green II | 250 µL | 1.25 mL | 200X，溶于DMSO | 2-6℃ 干燥避光 |
B. Qbtest TM 1 × Buffer | 50 mL | 250 mL | 1XTE Buffer | 2-6℃ |
C. Qbtest TM dsDNA 标准液1(10 ng/μL） | 1 mL | 5 mL | 10 ng/μL | 2-6℃ |
D. QbtestTM dsDNA 标准液2(使用组分B） | 1 mL | 5 mL | 0 ng/μL | 2-6℃ |
产品参数：Ex/Em: 480/520 nm（结合 dsDNA ）
产品介绍
该试剂盒可用于 Qubit 仪器。 Lab-Green II 双链 DNA 定量试剂盒是荧光检测 dsDNA 并进行定量的一种产品 ，这种检测方法非常灵敏。常用于分子生物学中 cDNA 文库的构建、亚克隆 DNA 片段的纯化及应用 ，如进行 DNA 定量、产物扩增和引物的进一步检测。常规的 DNA 含量检测方法是在 260 nm 处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大 ，并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰 ，无法区分 DNA 和 RNA ，而且灵敏度低（ 5 μg/mL dsDNA 溶液 A260 =0.1 ）。Lab-Green II 双链 DNA 定量试剂盒检测方法简单方便。
Lab-Green II 只有与 dsDNA 结合后才发出荧光 ，并且荧光强度与 DNA 浓度成正比。 Lab-Green II 双链 DNA 定量试剂盒可以检测出 10 pg/μL-100 ng/μL 范围内的 dsDNA ，且线性关系较好(R2 >0.99)。
实验步骤
1.试剂制备
Lab-Green II 以浓缩液形式保存在有机溶剂中。实验时，配制工作溶液：使用 dsDNA Buffer 按比例将适量
dsDNA Reagent 稀释至 1×（例：取 1 μL dsDNA Reagent，加入 199 μL dsDNA Buffer） ，现用现配。工作液配制好后， 3 小时内使用。由于试剂容易吸附到玻璃表面，需在塑料容器中配制。Lab-Green II 试剂见光易降解，注意避光保存。
2.实验方法
（1）准备足够量的 0.5 mL 的可用于 Qubit 仪器的 Ep 管。
注：Qubit 仪器适用 Ep 管为透明的薄壁 Ep 管，Ep 管的侧面不要做标记，以免影响荧光值采集。
（2）制定标准曲线。准备两个 Ep 管，每管加入 190 µL 配置好的 1× Lab-Green II 工作液，再分别向两个 Ep 管中加入
10 µL 标准液1和标准液2，涡旋震荡 2-3 s，震荡过程中不要产生气泡。
注：确保加入的标准液1和标准液2是 10 µL，终体积为 200 µL。
（3）添加一定量体积的 1× Lab-Green II 工作液到待测样品中，确保最终体积为 200 µL。涡旋震荡2-3s，震荡过程中不要产生气泡。
注：一般添加样品的体积为 1-20 µL，相应的添加 1× Lab-Green I I 工作液的体积为 199-180 µL。
（4）室温避光孵育 2 min。
（5）按照 Qubit®荧光仪的操作说明，选择 dsDNA High Sensitivity 检测程序测定荧光信号值。读取数据，生成标准曲线，计算样品中 DNA 的浓度。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2. 1× Lab-Green II 工作液最好现配现用，以保证最佳结果。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验流程示意图
