测定原理

铁是一种矿物质，在DNA合成、电子转移和氧运输等许多生物过程中发挥着至关重要的作用。铁是一种过渡元素，可形成一系列氧化态，最常见的是铁II（Fe²⁺或亚铁）和铁III（Fe³⁺或三价铁）。含铁蛋白参与许多反应，通常利用铁的氧化态的瞬时变化进行化学反应。在该测定中，通过添加酸性试剂而使样品释放铁。可直接测定样品中的Fe²或将样品还原后测量总铁（Fe²⁺和Fe³⁺）。释放的铁与发色团反应，得到的比色（590nm）产物与样品中的铁含量成比例。铁含量检测试剂盒提供了一种简单方便的铁含量测定方法，适用于各种生物样品。检测范围300mg/L至10mg/L。

试剂组成与保存

试剂 A： 50 mL      试剂 B： 3 mL       试剂 C： 3 mL       标准品： 1 mL Fe²   100 mg/L        

储存：所有试剂4℃保存。有效期 1年

检测步骤

1、反应试剂配制：按 200mL试剂A、1 0mL试剂B和1 0mL试剂C的比例混合，配制足够的反应试剂。现配现用，检测前放至常温。

2、标准品稀释：将50 mL 100 mg/L标准品与450 mL 蒸馏水混合，配制成400 mL 10mg/L混合液。稀释标准如下：

取50mL稀释后的标准液和两组50mL样品分别加入96孔板（透明平底）中，每个孔加入200mL反应试剂；对于血清/血浆样本，建议测试一个空白样本，即在一个单独的孔中测试50mL样本，并在该空白孔中加入200mL 试剂A，轻轻振荡混匀。

3、常温培养40分钟，读取590nm的吸光度。

样品中的铁浓度计算公式：

4、如果只测定Fe²⁺的含量，可以通过混合20倍试剂A、1倍水和1份试剂C来配制反应试剂。其余步骤与总铁量的检测程序相同。

注意事项

1.EDTA会干扰检测，样品中应避免使用； 1 mg/L Fe相当于17.9 mM。

2.本产品仅供研究用，使用过程中应严格遵循实验安全措施。