保质期 6个月

产品说明

过氧化物（如过氧化氢H2O2）是分子氧代谢产生的活性氧类，可作为细胞内信使和氧化应激来源。细胞可通过多种机制产生过氧化氢，如嗜中性粒细胞和巨噬细胞（呼吸爆发）中由NOX介导的ROS形成过程，或在线粒体呼吸的电子泄漏过程中由超氧阴离子歧化酶生成。 异常生成的过氧化氢会引起细胞氧化损伤和一些疾病进程，如哮喘、动脉粥样硬化、骨质疏松和神经退行性病变。本公司研制的过氧化物检测试剂盒可直接用于生物样品的检测，免除了预处理过程。检测原理是利用试剂中的Fe2+ 被样品中的过氧化物氧化为Fe3+，并能与二甲酚橙反应生成紫色复合物的特性，在波长585nm检测，其颜色深浅程度与样品中过氧化物的含量成正比。通过配方的改良，充分减小了未处理的样品中其它杂质的干扰。检测范围在0.4 – 100 μM 。

适用范围

可直接检测血清、血浆、尿液、细胞培养液中过氧化物含量。

试剂盒组成与保存   

试剂A：1 mL                                4°C保存

试剂B：40 mL                              4°C保存

标准品：1 mL 3% H2O2                4°C保存

检测步骤

样本处理：一些化学成分会干扰检测，在样本准备时要避免接触，这类物质包括：抗坏血酸、乙二胺四乙酸、肝磷脂、二甲基亚砜(>0.02%)，三硝基苯酚(>0.6%)，SDS(>0.12%)，氨基丁三醇(>8mM)和乙醇(>0.4%)。新鲜的样品可以立即用于检测，或在-20°C下保存，不要反复冻融。如果样品出现颗粒，应离心后取上清进行检测。

试剂准备：

检测前所有试剂须放置至室温。准备反应试剂，按试剂A：试剂B = 1：100的比例配制足量反应试剂。

1. 标准品：标准品应在检测前现配，在1.5mL 的离心管中混合10 μL3%的双氧水和990μL纯水。再取混合后的溶液5μL 与1465μL纯水混合，最终的双氧水的浓度为30 μM(标注“预混液”)，按下表比例将其稀释：

2. 将稀释后的标准品和样品各取40 μL，放入透明平底96孔板不同孔中。取200 μL反应试剂加入所有标准品孔和样品孔中。

3. 室温下反应30分钟，在585nm处读取吸光度，注：若极少数情况下加入试剂后产生沉淀，可将反应液转入1.5毫升的离心管，14,000rpm离心2分钟，再小心移取200 mL上清液至一干净孔，读OD值，乘以1.2校正体积因素。

浓度计算

用标准品OD值减去空白对照(标号8)OD值，以此值对双氧水浓度作标准曲线。

样品：用样品(OD值)减去空白对照(OD值)，以此OD差值对照标准曲线，得出样品过氧化物的浓度。

注意事项：本产品仅供研究用，使用过程中应严格遵循实验安全措施。