一般说明
蛋白质由多肽氨基酸组成，它在生物体内发挥着各种关键的作用。简单、直接、自动化的蛋白质浓度检测方法是最为推荐的。本公司生产的蛋白质测试法是基于改进的考马斯蓝G的方法。显色剂与蛋白质经过复杂反应形成蓝色，其颜色强度（595nm）与样品中的蛋白质浓度成正比。优化配方大幅减少了原样品中物质的干扰。如：葡萄糖、维生素、氨基酸、DNA、 RNA、盐、 EDTA (< 12 mM) 、 苯酚 (< 50 mM) 、 尿素 (< 0.6 M) 、表面活性剂 (< 0.1%) 和SDS (< 0.1% SDS) ，检测范围 0.06 – 1.0 mg/mL 蛋白质。
应用
直接检测样品蛋白质的总含量。
试剂盒组成
浓缩试剂: 20 mL 5倍浓缩试剂 标准品: 1 mL 1.0 mg/mL BSA
储存：反应试剂常温保存，标准品 -20°C 下保存。
反应试剂准备:
按如下比例配制足量的反应试剂，按1：5比例将 5倍浓缩试剂用蒸馏水稀释，现配现用。使用前放置至室温。
检测步骤:
1. 按照下表比例稀释标准品。取透明平底96孔板，将10 mL 稀释的标准品和稀释的样品放入不同孔中。将稀释的标准品在 -20°C 保存备用。
标号 | 标准品 + H2O | 终量(mL) | mg/mL | mg/10 mL |
1 | 100mL + 0mL | 100 | 1.0 | 10 |
2 | 80mL + 20mL | 100 | 0.8 | 8 |
3 | 60mL + 40mL | 100 | 0.6 | 6 |
4 | 40mL + 60mL | 100 | 0.4 | 4 |
5 | 30mL + 70mL | 100 | 0.3 | 3 |
6 | 20mL + 80mL | 100 | 0.2 | 2 |
7 | 10mL + 90mL | 100 | 0.1 | 1 |
8 | 0mL + 100mL | 100 | 0 | 0 |
2. 加入 200 mL 反应试剂，轻敲孔板使其混合。
3. 在595nm处读取吸光度。
浓度计算
从标准品的测值中减去空白对照（标号8）的测值，绘制DOD与标准浓度的曲线。用标准曲线确定样品的蛋白质浓度。
备注：
1、如果蛋白质浓度 > 1 mg/mL，用蒸馏水稀释样品，以标准曲线范围内的吸光度值计算样品的蛋白质浓度。试剂和样品混合后尽快读出吸光度的值。高灵敏度测试：将50 mL 样品 加入 200 mL 反应试剂可提高测试的灵敏度 (测试范围 3 – 200 mg/mL).
2、预防措施：本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。
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