保质期1年

说 明

α-淀粉酶，系统名称为1,4-α-D-葡聚糖葡聚糖水解酶，别名为液化型淀粉酶、液化酶、α-1，4-糊精酶。黄褐色固体粉末或黄褐色至深褐色液体，含水量5%~8%。溶于水，不溶于乙醇或乙醚。α-淀粉酶是哺乳动物的一种主要消化酶，人体中淀粉酶水平的增加与唾液腺创伤，及唾液腺、胰腺发炎和肾功能衰竭引起的腮腺炎有关。在科研和药物开发中，简单、自动化的a-淀粉酶检测手段是最为理想的。本公司的的a-淀粉酶检测包含两个步骤：(1) a-淀粉酶将样品中的淀粉水解，其产物在a-葡糖苷酶和葡糖氧化酶的作用下，转变为葡萄糖和双氧水。(2) 利用一种比色试剂，检测出双氧水浓度。检测敏感、准确：用96孔板检测，a-淀粉酶活性检测范围为0.5 - 50 U/L。

应 用

直接检测血清、血浆、唾液、尿液和其它生物样品中α-淀粉酶的活性。

试剂盒组成与保存

   缓冲液(pH 7.0): 20 mL        底物： 120 μL

   检测试剂：        20 mL        标准品： 1 mL

    酶A：              120 μL        酶B： 120 μL

 储藏条件：底物和检测试剂在4°C的环境下保存，其它试剂在-20°C下保存。

检测准备

试剂：将所有试剂放置至室温，并用冰或冰箱保存解冻的酶。底物可能有沉淀，震荡试管使其溶解。

样品：检测时推荐采用新鲜样品。在冷冻条件下，a-淀粉酶可以稳定一个月。抗坏血酸、肝磷脂、EDTA、EGTA、柠檬酸盐、SDS、Tris(>8 mM) 和酒精(> 0.4%)会影响检测，应避免接触。在检测前用缓冲剂稀释样品，推荐比例为：血清50倍，唾液2000倍。

检测步骤

1、取10μL提供的标准品与406μL 缓冲液混合，得到400μM的葡萄糖标准品。取透明平底96孔板，分别将10μL缓冲液、10μL400μM的葡萄糖标准品和两份10μL的样品放入不同孔中。

2、为每个反应孔准备适量的工作试剂：40 μL缓冲液、0.5μL底物、1 μL酶A、1μL酶B。

在每孔中加入40μL工作试剂，轻敲使其混合。在室温下反应15分钟。

3、向每孔中加入150μL检测试剂，混合并在室温下反应20分钟，用微孔板分析仪读取OD585nm（540-610nm）值。

计 算

OD样品、OD空白、OD缓冲 和OD标准 分别是样品、空白对照、缓冲液和400 μM葡萄糖标准品的吸光度。t是反应时间（一般等于15min），n是稀释因数（血清为50，唾液为2000）。在检测条件下，一单位酶每分钟催化产生1 μmole葡萄糖。

注意：如果结果高于50U/L,用缓冲液稀释样品并再次检测，检测结果需乘以稀释因数。

注意事项：本产品仅供研究用，使用过程中应严格遵循实验安全措施。