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  • 葡萄糖检测试剂盒(酶法)(货号:PTTM100)
  • 葡萄糖检测试剂盒(酶法)(货号:PTTM100)

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    • 试剂规格:
    • 100T
CAS:


 

一般说明

葡萄糖(glucose),有机化合物,分子式C6H12O6。是自然界分布最广且最为重要的一种单糖,它是一种多羟基醛。本公司的葡萄糖试剂盒采用单一工作试剂, 将葡萄糖氧化酶反应葡萄糖含量的测定合并到同一步骤。反应产物的吸光强度(570nm)或者荧光强度(585/530nm)与样品中葡萄糖的浓度成正比。检测范围:比色法5 - 300 mM,荧光法 1 - 30mM

 

适用范围

直接检测:生物样品如血清、血浆、尿液的葡萄糖浓度。

 

试剂盒组成(96孔板供100份测试)

 缓冲液: 10  mL           酶试120 mL       

 显色剂:120 mL            标准液:1 mL 3g/L葡萄糖

储存:所有试剂均于-20°C保存。有效期 1年

 

比色法检测

样品准备:唾液样品应在化验之前以14000rpm的转速离心 5分钟。牛奶样品应按100 mL 6N HCl600 mL milk的比例混合,以14000rpm的转速离心并转移上清液到一洁净管,每毫升上清液添加170 mL 6N NaOH中和。并再以14000rpm的转速离心。取上清液检测。在此过程中稀释系数为n = 1.36

样品收集后应立即检测,或储存于-20 ° C。避免反复冻融。如果有悬浮微粒存在,离心样品并使用上清液检测。

 

1. 将所有试剂放置至室温检测过程中将已解冻的酶试剂始终置于冰箱内或者冰上。

2. 标准品和样品:15mL 3g/L标准液与818mL 蒸馏水dH2O混合预混浓度为300 mM)。用dH2O稀释标准品,比例如下:

转移20 mL稀释的标准品和样品至每个孔内

标号

预混液   +  H2O

终量(mL)

(mM)

1

200 mL +     0 mL

200

300

2

120 mL +   80 mL

200

180

3

60 mL + 140 mL

200

90

4

0 mL + 200 mL

200

0


3. 反应试剂: 对每个反应孔按85 mL 缓冲液, 1 mL 酶试剂(在移液前稍微摇晃), 1 mL显色剂的比例在一试管内混合,向每孔加入80 mL反应试剂。轻轻振荡混匀。

4.室温下培养30分钟,读取570nm波长处的吸光度。

 

浓度计算

从标准品的测值中减去空白对照的测值(标号4),绘制DOD与标准浓度的曲线。测定斜率(Slope)并计算样品中葡萄糖的浓度

单位换算:1 mM葡萄糖相当于55.5 mM, 0.001% or 10 ppm  

 

荧光法检测

对于荧光法检测,线性检测范围为1 -30mM葡萄糖。用比色法中的标准液10mL190 mL 蒸馏水混合得到301890mM的标准液转移20 mL标准品和20 mL样品至黑色96孔板的相应孔内添加80 mL反应试剂(参看比色法)轻轻振荡混匀

室温下培养30分钟,读取 (585/530nm) 荧光强度。样品的葡萄糖浓度计算同上。

注意

(1)如果计算出样品中葡萄糖的浓度高于300mM(比色法)或者30mM(荧光法),用水稀释样品并再次检测,用稀释系数n乘以结果

(2)检测酚红培养基中的葡萄糖浓度时,比色法应用不含葡萄糖的培养基稀释样品和标准品。对于荧光法应先用酚红培养基稀释标准品,再用水20倍或以上倍数稀释样品和标准品后检测 

 

注意事项本产品仅供研究用使用过程中应严格遵循实验安全措施。

 


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