
货号:S6001
存储条件:-80℃保存2年,-20℃保存6个月。
产品组分
组分 | 规格 |
ssRNA Marker 1000 | 2×25 μl |
2× RNA Loading Buffer | 1 ml |
注:2× RNA Loading Buffer成分:95% 甲酰胺,0.02% SDS,0.02% 溴酚蓝,0.02% 二甲苯青,1 mM EDTA。
产品简介
本产品由体外转录得到的6条高纯度单链RNA组成,长度分别 为100、200、300、400、600、1000 nt,每微升产品中 RNA 量约 为500 ng,适用于RNA常规凝胶电泳
质量控制
浓度 经NanoDrop测定,本品中RNA浓度为500 ng/μl±4%。
凝胶电泳 使用2% TBE凝胶电泳检测,本品的6条RNA带型清晰,无降解或弥散。
使用方法
一、普通琼脂糖凝胶电泳
1. 取 1~2 μl ssRNA Marker 1000 加入等体积2× RNA Loading
Buffer 并混匀,然后65℃加热10 min,迅速转移至冰上冷却3 min;样品需和ssRNA Marker进行相同的处理,可通过无核酸酶水稀释样品并补加2× RNA Loading Buffer调整体积;
2. 配制2%或更高浓度的TBE琼脂糖凝胶并电泳;
3. 将电泳完成的凝胶进行染色并拍照。
二、甲醛变性琼脂糖凝胶电泳
1. 配制3%甲醛变性琼脂糖凝胶:
称取1.5 g琼脂糖加入36 ml DEPC水中,加热融化后,加入5 ml 10× MOPS Buffer,待溶液冷却至不烫手时,加入9 ml 37%甲醛溶液(在通风橱中操作),轻柔混匀(透光观察无油状物)后倒胶,室温凝胶30~60 min;
2. ssRNA Marker 1000和样品处理方式与普通琼脂糖凝胶电泳一致;
3. 将琼脂糖凝胶放入电泳槽,在电泳槽中加入1× MOPS Buffer至没过凝胶,10 V/cm条件下预电泳10 min;
4. 上样,5~10 V/cm条件下电泳至溴酚蓝迁移至胶的2/3左右位置,电泳过程中应每隔10~20 min混匀电泳槽中的电泳液一次;
5.电泳结束后,将凝胶在DEPC水中浸泡15 min,除去凝胶中的甲醛;
6. 染色20~30 min(避免染色过久导致RNA降解),拍照。
注意事项
1. ssRNA Marker 与普通RNA一样极易被RNase降解,因此实验时请戴好手套、口罩,实验的仪器及溶液应经DEPC处理,凝胶及电泳缓冲液应现用现配。
2. 若需得到更高质量电泳结果,可适当减小制胶厚度,满足上样量需求即可;
3. ssRNA Marker 条带为单链线性RNA,适用于单链线性RNA样品的分子量参照,对于Total RNA,本产品只能作为定性参照。
4. 本产品RNA不含Poly(A)尾,无法用于逆转录实验。
5. 2× RNA Loading Buffer 中含有毒害性的甲酰胺和甲醛,使用时请戴口罩、防护手套及工作服。如果使用时不慎洒到皮肤上,请用大量清水冲洗,必要时直接到医院就诊。
6. 本产品仅供科研使用。
条带展示