产品货号:M1056
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产品描述:
支原体又称霉形体,归属于柔膜体纲,没有细胞壁,也不能合成细胞壁前体,有三层结构的单位膜,不能维持固定的形态而呈现多形性它广泛存在于自然界中,有80余种,污染细胞最常见的支原体包括发酵支原体、猪鼻支原体、口腔支原体、精氨酸支原体、梨支原体、唾液支原体和人型支原体。支原体通常附着在细胞的表面,并影响其宿主细胞的生理、遗传等多方面的正常功能,用这些污染后貌似正常的细胞做试验或生产,将会严重影响结果。
支原体清除剂是解决细胞培养中支原体污染严重问题的有效方法。本试剂是抗生素衍生物,通过抑制支原体DNA旋转酶解旋酶去除支原体感染。在推荐使用浓度情况下,能够有效去除多种支原体,并且具有预防支原体污染复发的作用。具有很强的抑制支原体活性的能力,一周之内即可从被污染的培养细胞中彻底去除支原体。
产品特点:
1) 具体很强的抑制支原体活性的能力,从污染的培养中彻底清除支原体:通过抑制DNA促旋酶清除支原体污染,该酶是微生物DNA复制过程中必不可少的酶类。
2) 活性范围广:活性在细胞培养物中可以维持长达7天,对多种支原体株系均有作用。
3) 作用浓度低,细胞毒性小:在推荐浓度下使用,细胞毒性极小,因此也可以作为预防支原体污染使用的试剂。实验表明,与其他品牌的同类产品相比,对正常培养的细胞没有致死效应。
4) 防止支原体污染复发:一旦使用了,培养细胞就不会再受到同样的支原体污染,从而起到预防污染复发的效果。
5) 使用方便:使用非常方便,即拆即用,只要添加到支原体污染的培养细胞中孵化一周即可。
操作说明
1. 将MRA加到被支原体污染的细胞培养基,终浓度为1X,孵化一个星期。(如在一个25 cm2 的培养瓶中,10mL的培养基添加10uL的MRA)
2. 使用含有相同浓度MRA的培养基换液。
3. 使用不含MRA的细胞培养基多次换液以确认支原体的污染不再发生。
4. 可以用一个支原体检测试剂盒来检测污染。
5. 如果担心血清或胰蛋白酶中存在支原体,在培养基中添加终浓度为1X MRA,可以预防支原体污染。
注意事项
本产品仅用于研发,仅仅作为一种细胞培养基的支原体清除剂。
使用该产品时要注意佩戴手套口罩,遵守实验室规范。
使用推荐浓度时,对细胞毒性及低。但是,对于任何特定功能的细胞,建议保留理想的细胞特征以供处理后确认。
实验数据
1. 支原体去除效果--自然感染
MRA浓度(ug/ml) | 持续培养时间 (天) | ||||
0 | 7 | 14 | 21 | ||
人源性细胞A(人黑素瘤) | 0.39 | + | - | - | - |
0.2 | + | - | - | - | |
0.1 | + | - | + | + | |
0 | + | + | + | + | |
人源性细胞B(人肺癌) | 0.78 | + | - | - | - |
0.39 | + | - | - | - | |
0.2 | + | - | - | - | |
0.1 | + | + | + | + | |
0 | + | + | + | + |
+ 支原体阳性; - 支原体阴性; MRA持续处理时间:7天
2. MRA与市场上其他药物功能的比较
MRA | Tiamulin | Minocycline | ||||
MIC* | MMC** | MIC | MMC | MIC | MMC | |
M.orale CH-19299 | 0.05 | 0.1 | 0.0031 | 3.13 | 0.05 | 25 |
M.arginini G-230 | 0.1 | 0.2 | 0.0063 | 12.5 | 0.2 | >100 |
M.hyorhinis BST-7 | 0.05 | 0.1 | 0.0031 | 0.39 | 0.0031 | 0.39 |
A.laidlawii PG-8 | 0.0125 | 0.025 | 0.05 | >100 | 0.05 | >100 |
MMC/MIC | 2 | 128 -----> 2048 | 512 ------> 2048 |
M代表支原体; A代表血浆; MIC代表最小抑制浓度; MMC代表最小灭支原体浓度
3. MRA对其他支原体的最小抑制浓度(ug/ml)
Species | MIC |
Mycoplasma fermentans PG-18 | 0.0125 |
Mycoplasma salivarium PG-20 | 0.1 |
Mycoplasma hominis PG-21 | 0.1 |
Mycoplasma buccale CH-20247 | 0.025 |