货号：T2113

存储条件：-20C避光保存，Trans buffer可保存于2-8℃，有效期一年，使用前请先将本品轻轻混匀。

产品说明：

LabFect Plasmid质粒DNA转染试剂是专门用于质粒DNA细胞转染的转染试剂。LabFect Plasmid 具有非常卓越的转染性能，可高效转染多种贴壁细胞、原代细胞和悬浮细胞，转染效率在贴壁细胞中高达90%以上（EGFP质粒）。LabFect Plasmid 不仅可转染较大分子的质粒DNA，还可转染RNA和小分子DNA。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同，LabFect Plasmid 采用生物可降解材料配制，对细胞的毒性很低，转染后细胞死亡率不到10%。LabFect Plasmid 使用也非常方便，先将转染试剂与质粒DNA混合，再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中，血清不影响其转染效果，不必刻意添加或更换培养液，操作十分简便。

产品特点：

卓越的细胞转染性能：可高效转染多种原代细胞，转染效率高达70%以上；

极低的细胞毒性：使用可降解生物材料，细胞毒性低，转染细胞死 亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，实验结果更为客观；

操作简便，可用于含血清培养基培养细胞的转染，转染前后不需要更换培养液。

注意事项：

转染前的细胞汇合度以90%左右为宜，转染时细胞生长状态应保持良好，不要有支原体污染。

1、首次转染，建议进行优化实验，如24孔培养板，每孔质粒用量0.8ug，转染试剂用量可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul、3.5ul进行优化。

2、应避免转染复合物制备体系中存在血清，因血清会干扰RFect与DNA形成复合物，转染所用培养基中尽量不要使用抗生素。

3、如果需要稳转，请在转染24-48h后加入筛选培养基。

4、本试剂主要用于质粒DNA转染，如需质粒DNA、RNA、siRNA均可转染的试剂，请选择RFect Prime核酸转染试剂。

适用细胞系：

293T，A549，B16F10，HEK 293，HeLa，Hepa 1-6，HepG2，BHK-21，BNL.CL2，BRL-3A，C2C12，C6，Clone 9，COS-1， COS-7，Daoy，DBTRG-05MG，DI-TNC1，DU 145，HLF-a，Huh-7，K562，KB，KLN 205，NCaP-FGC，MCF-7，MEL，Neuro-2a，NIH3T3，OVCAR3， PC3，PC-12，4T1，ACNN，BJ，BT-549，CACO-2，H460，H9C2，HCT116，Hep-3B，Hs578T，HT-1080，MCF10A，MDA-MB-231，NCI-H23，PANC-1，RAW264.7，Saos-2，RD，SK-MEL-28，SK-OV-3 SW480，U2OS，Vero，293F，BE(2)C，CHO-S，CV-1，HT-29，Jurkat，RKO，SK-BR3 等。

试剂盒内容物：LabFect 质粒DNA转染试剂

方法步骤（以24孔板转染为例）:

1. 细胞接种:

a. 转染前24小时左右对细胞进行铺板（不含抗生素），培养过夜；

b. 确保转染时细胞密度达90%左右。

c. 最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基，以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。

2. LabFect/DNA复合物包装(该步完成后应立即转染):

a. 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl trans buffer，并添加适量的转染试剂(参见附表) 。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。 

b. 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl trans buffer，并添加适量的DNA，用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。(参见附表。首次使用建议在附表提供的DNA和转染试剂参考量的基础上进行优化实验，以摸索两者之间的最优搭配比例)。

c. 将LabFect-培养基混合物滴加至DNA-培养基混合物中，用移液器 轻轻混匀后在室温静置15~20分钟后，立即转染。注意： LabFect-培养基混合物和DNA-培养基混合物的混合次序非常重要，切勿颠倒。离心管最好使用聚丙烯离心管。

3. 转染:

a. 将步骤2制备的转染复合物滴加至培养基中，边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后，立即将培养板转入培养箱继续培养。

b 培养12小时后即可观察，最佳观察或收获时间为24~48小时。

c. LabFect在完全培养基中仍有较高的转染效率，因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基， 请于加入LabFect/DNA复合物12~24小时后进行。

质量控制

本产品经严格的质量检验证明，无生物污染

注意：

本产品仅用于科研实验

附表：不同培养体系推荐初始转染条件