货号：P0212

储存条件：-20℃保存；尽量避免反复冻融。

产品简介

One Step RT-qPCR Probe Kit v2 是以 RNA 为模板进行多重逆转录 -荧光定量 PCR 反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行，简化了实验操作，降低了污染的风险。本试剂盒利用耐热 Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA，并利用热启动 Ab-Taq DNA Polymerase 进行定量扩增，适用于探针法qPCR。本产品已包含除引物和样品 RNA 以外的所有逆转录-荧光定量PCR 组分，包括 RNase 抑制剂、RTase、Ab-Taq。可减少操作步骤，缩短加样时间，降低了污染几率。

适配机型

不需要 Rox 校正：Bio-Rad 全系列、Roche 全系列、Eppendorf 全系列、Takara 全系列、Qiagen 全系列、宏石全系列、天隆全系列、博日全系列、雅瑞全系列等；

需添加 High Rox：ABI 5700，7000，7300， 7700，7900HT Fast， StepOne™， StepOnePlus™ 等；需添加 Low Rox ：ABI 7500，7500 Fast，ViiA™7，QuantStudio™ 3 and 5，tratageneMX3000P™，MX3005P™，MX4000P™ 等。

使用方法

1. 使用注意

①使用前应室温充分融化，混匀并瞬时离心；

②反应液应尽量避免产生气泡；

③待测 RNA 应尽可能新鲜，提取过程中严防 RNase 污染。

a. 引物推荐终浓度为 0.2 μM，效果不佳时可以在 0.1~1 μM 进行调整；引物长度请设定 18~25 bp，GC 含量为 40%~60%；

b. 探针终浓度推荐为 0.25 μM，效果不佳时可以在 0.1~1 μM 进行调整；

c. 模板推荐加样量为 1~5 μl。qPCR 灵敏度极高，建议将模板进行稀释使用，控制 Ct 值在 20~35 之间；

d. 请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。

2. 反应程序（可根据机型适当调整）

注意事项 

实验过程中请使用 RNase free 耗材。