货号：PF001
存储条件：4℃保存，避免冻融
产品说明
LabFectin 是新型脂质体转染试剂，通过携带的正电荷与核酸 (DNA,mRNA,siRNA, microRNA等)的负电荷相互吸引形成稳定的复合体，进而通过与细胞膜融合或者内吞的方式携带核酸到细胞内部，适用于绝大多数的原代细胞或细胞系。
产品优势
1、转染效率高：LABLEAD LabFectin新型转染试剂在常用细胞系转染效率明显优于其它品牌转染试剂产品具体结果如下:
2、不同条件储存稳定性高-不同储存条件和储存时间下转染试剂的效率稳定。
3、对于贴壁细胞和悬浮细胞均适用。
4、无明显细胞毒性。
贴壁细胞转染(以 HEK293T 细胞为例)
1、第一天，将293T细胞接种到6孔板中，细胞密度控制在 70%-90%为宜。(具体细胞数目参照附表1.根据不同细胞的体积适当调整)
2、第二天，先取1ug质粒加入到盛有100uL无血清DMEM基础培养基离心管中，吹打混合均匀，然后加入3uLSuperFectin 转染试剂，吹打混匀，室温孵育15-20分钟。
注：上述培养基可用OptiMem 或细胞相应的培养基替换例如：MEM、1640、F12等)
3、将100ul质粒/SuperFectin 转染试剂复合物均匀滴加到6孔细胞培养板孔中，轻轻晃动细胞培养板使其均匀分布。
注：6孔板中为完全培养基，轻轻晃动细胞培养板即可，切勿剧烈摇动细胞培养板，以免细胞脱落漂浮！
4、细胞转染 4-6小时后，更换新鲜完全培养基。注：换液时，弃原有完全培养基，补加新鲜完全培养基
5、细胞转染24-48小时后，可收集细胞进行后续检测。
注意事项
1. 转染前细胞应处于良好的生长状态，以对数生长期为佳，推荐细胞传代后12-24小时内细胞密度为70-90%时进行转染；
2. 使用高质量的质粒有利于获得较高的转染效率，推荐使用无内毒素质粒抽提试剂盒抽提质粒，A260/A280比值为18~20，质粒浓度在300ng/uL以上；
3. 在配制转染试剂与质粒复合物时，需使用无血清无抗生素的基础培养基作为溶剂，细胞培养孔中的完全培养基不影响细
胞转染效率
4. 在细胞转染实验中，根据细胞转染效率可适当调整质粒与转染试剂的用量比例，一般质粒的量(ug)与SuperFectin 转染试剂剂量(uL)使用比例在1:1~1:4之间，推荐比例为1:3；对于毒性比较敏感的细胞建议转染4-6小时后，更换新鲜完全培养基；
5. 转染试剂如遇沉淀，轻轻摇动管身，至沉淀溶解即可使用。
6. 本产品仅限用于科学研究，不得用于临床诊断和治疗。
附表1.常用细胞培养装置转染前一天细胞接种的推荐数量和培养体积
培养耗材 | 接种细胞数量 | 细胞培养液体积 |
96孔板 | （1-3）*104 | 0.1-0.2 ml |
24孔板 | （1-3）*105 | 0.5-1 ml |
12孔板 | （2-4）*105 | 1-2 ml |
6孔板 | （3-5）*105 | 2-3 ml |
150px 皿 | （5-10）*105 | 3-5 ml |
250px 皿 | （3-5）*106 | 8-10 ml |
125 ml摇瓶 | （1.5-2.5）*107 | 30-35 ml |
500 ml摇瓶 | （6-10）*107 | 120-140 ml |
1000 ml摇瓶 | （1.2-2）*108 | 240-280 ml |
附表2. 常用细胞培养装置转染各组分推荐用量（质粒转染）
培养耗材 | 质粒（ug） | LabFectin（ul） | 基础培养基（ul） |
96孔板 | 0.2 | 0.4 | 10 |
24孔板 | 1 | 2 | 50 |
12孔板 | 2 | 4 | 100 |
6孔板 | 2-4 | 4-8 | 200 |
150px 皿 | 3-5 | 6-10 | 400 |
250px 皿 | 5-10 | 10-20 | 1000 |
125 ml摇瓶 | 30-35 | 60-70 | 3000 |
500 ml摇瓶 | 120-140 | 240-280 | 12000 |
1000 ml摇瓶 | 240-280 | 480-560 | 24000 |
附表3. 常用细胞培养装置转染各组分推荐用量（siRNA转染）
培养耗材 | SiRNA（pmol） | LabFectin（ul） | 基础培养基（ul） |
96孔板 | 4 | 0.2 | 10 |
24孔板 | 20 | 1 | 50 |
12孔板 | 40 | 2 | 100 |
6孔板 | 100 | 5 | 200 |
150px 皿 | 200 | 10 | 400 |
250px 皿 | 600 | 30 | 1000 |
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