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  • 转染试剂 Lipo3000(货号:TR002)
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CAS:
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货号 :TR002

存储条件 :2-8℃保存一年。(避免冷冻)

 

产品说明

LABLEAD Lipo3000 试剂采用了脂质纳米颗粒(Lipid Nanoparticle)LNP 递送技术, 利用脂质形成纳米微粒将核酸包裹起来形成核酸脂质纳米粒 ,实现高转染性和可重复性的实验结果。其可针对广泛类型的常见及难转染细胞 ,实现超高转染效率 ,同时提供更高的细胞活力。Lipo3000 对大多数细胞毒性低并且性质温和 ,并且我们优化了转染过程的全部四个步骤 ,并结合脂质体纳米颗粒(LNP)递送技术 ,实现了较高的转染性能并可以降低所需的试剂量 ,同时尽可能降低对细胞系产生毒性的风险。对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率 ;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。

适用范围 :贴壁细胞和悬浮细胞( 哺乳动物细胞系 )的转染。

产品特点 :

1) 卓越的转染效率—针对较难转染细胞 ,可将效率提升 2~ 10 倍

2) 作用温和 ,细胞毒性低—可改善细胞活力

3) 高性价比高 ,同时实现更好的转染结果


使用方法

DNA 的转染

对大多数细胞来说 ,转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平 ,并能减少细胞毒性。

1. 接种细胞至 70-90%汇合度时转染。

2. 按照下表使用 Opti-MEM 培养基稀释 Lipo3000-B 试剂(建议同时用 2 管) ,充分混匀

3. 使用 Opti-MEM 培养基稀释 DNA ,制备 DNA 预混液 ,然后添加 Lipo3000-A 试剂 ,充分混匀。

4. 在每管已稀释的 Lipo3000-B 试剂中加入稀释的 DNA (1:1 比例)。

5. 室温孵育 5 分钟。

6. 加入 DNA-脂质体复合物至细胞中。

7. 37℃孵育细胞 2-4 天。然后分析转染细胞。

siRNA 转染

转染 siRNA 至细胞中时 ,遵循如上所述的 DNA 实验方案 ,但在稀释 siRNA 时不要加入 Lipo3000-A 试剂(第 3 步)。



细胞培养容器


96-well

24-well

6-well

60mm 皿

100mm 皿

贴壁细胞


1~ 4 ×104

0.5 ~ 2 ×105

0.25 ~ 1 × 106

0.75~3 x10⁶

2~8 x10⁶

Opti-MEM 培养基稀释Lipo3000-B 试剂

(建议同时用 2管用于设置梯度)

Opti-MEM 培养基

5ul ×2

25ul ×2

125ul ×2

375ul x2

1000ul x2

Lipo3000-B

0.15 和 0.3ul

0.75 和 1.5ul

3.75 和 7.5ul

11.25 和 22.5ul

30 和 60ul

Opti-MEM 培养基稀释 DNA ,制备 DNA 预混液 ,然后添加  Lipo3000-A 试剂 ,充分混匀

Opti-MEM 培养基

10uL

50ul

250ul

750ul

2000ul

DNA 

(0.5–5 ug/ul)

0.2ug

1ug

5ug

15ug

40ug

Lipo3000-A 试剂(2 ul/ug DNA)

0.4ul

2ul

10ul

30ul

80ul

Lipo3000-B 试剂中加入稀释的DNA (1:1 比例)

稀释的 DNA

5ul

25ul

125ul

375ul

1000ul

稀释的 Lipo3000-B

5ul

25ul

125ul

375ul

1000ul

室温孵育 5 分钟

加入 DNA-脂质体复合物至细胞中


96-well

24-well

6-well

60mm 皿

100mm 皿

DNA-脂质体复合物

10uL

50ul

250ul

750ul

2000ul

37°C 孵育细胞 2–4 天。然后分析转染细胞。



以上比例仅供参考,可根据实际情况设置更多比例以便优化实验条件。

特别提醒 :

本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究 ,不得用于临床诊断或治疗 ,不得用于食品或药品 ,不得存放于普通住宅。


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