货 号 : NO025

储存条件 :-20℃避光保存，有效期见外包装。

 产品介绍

Griess 试剂可用于光度法检测亚硝酸盐。试剂含有两种化学物质，磺胺酸和 N-（1-萘基）乙二胺。在酸性条件下，磺胺酸被亚硝酸盐转化成重氮盐，可与 N-（1-萘基）乙二胺形成高度着色的偶氮染料，可以在 548 nm 检测此染料：由于 NO 极其不稳定，被氧化生成亚硝酸盐和硝酸盐， Griess 通过检测亚硝酸盐的含量，间接反映出 NO 的含量。

 使用方法

1. 取出 Griess Reagent I 和 II，使其恢复室温。

2. 标准品稀释：用待测样品所用溶液稀释标准品 NaNO2（1-100 μM）。可将标准品稀释成 1 μM、10 μM、20 μM、40 μM、80 μM、100 μM，每孔加入 100 μL 标准品。若样品浓度太低，可适当降低标准曲线的范围（1 μM、2 μM、3 μM、4 μM、6 μM、8 μM、10 μM）。

3. 样品检测：

（1）按 200 μL/孔的总体积，在 96 孔板中加入 100 μL/孔的样品；如果样品为培养液上清，可直接取样，如有沉淀物则需离心后取上清。如样品为细胞或组织，可快速冻融裂解， 再离心取上清，体积不足 100 μL 可以用 diH2O 或 0.9% NaCl稀释（相应地标准品也需用 diH2O 或 0.9% NaCl 稀释）。

（2）按 50 μL/孔，在各孔中加入 Griess Reagent I。

（3）按 50 μL/孔，在各孔中加入 Griess Reagent II。 

（4）在 540 nm 处测定吸光度。如无 540 nm 滤光片，520-560 nm 的滤光片也可。如无酶标仪或合适的滤光片，也可以通过目测比色，确定样品中一氧化氮的浓度。目测比色时标准品需要更为精细的浓度梯度。

注意事项

1. 在使用 Griess 试剂之前，将其恢复至室温，并检查溶液是否有沉淀。如果 Griess Reagent I 取出时含有沉淀，可将

其置于 37℃水浴锅中，水浴直至沉淀溶解。

2. 本品有潜在危害性，避免长时间或反复接触。避免进入眼睛，皮肤或衣服上。请穿实验服并戴一次性手套操作。