10ml填料+30ml柱子
货号:G1075G-30ml
存储条件:2-8℃
产品名称分离范围应用
葡聚糖凝胶 G-10 <700 缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子葡聚糖凝胶 G-15 <1500 缓冲液交换、脱盐,
分离小分子,去除小分子葡聚糖凝胶 G-25 1000-5000 工业上脱盐及交换缓冲液葡聚糖凝胶 G-50 1000-30000 多肽分
离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定葡聚糖凝胶 G-75 2000-70000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定葡聚
糖凝胶 G-100 2000-120000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定葡聚糖凝胶 G-150 5000-300000 蛋白分离纯
化、分子量测定、平衡常数测定葡聚糖凝胶 G-200 5000-600000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
方法与步骤
1、平衡
使用 5~10 CV 的缓冲液平衡柱子,务必使流出液的电导和 pH 同上样缓冲液的电导和 pH 完全一致。
2、上样
1) 介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。
2) 凝胶过滤的上样量一般为 5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在 1%-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样
量可以达到 20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在 40-50 cm 以下,过高的凝胶层会引起较大的反
压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为 5:1 即可。
3)样品中如有杂质或沉淀应该在上样前过滤或离心除去,样品的粘度不能过高,否则影响分离效果。
3、洗脱
样品洗脱过程中使用的流速不要超过推荐的最大流速。凝胶过滤是一种非吸附性色谱技术,所有的样品物质都应在一个柱体
积之内洗脱出来。完成一个操作后,如仍用同一种缓冲液,色谱柱不需要再平衡。
4. 清洗
清洗后可以去除一些强结合性物质(例如一些强结合的蛋白、变性蛋白、脂类等),从而达到恢复介质的优良性能(流动性、
柱效等)。建议每使用 10 次后进行一次清洗,具体清洗频率需根据纯化的初始样品的洁净度和使用情况进行调整。
4.1 用纯化⽔冲洗 2 CV;
4.2 用 1M NaCI 冲洗 1CV;
4.3 用 0.2M NaOH 冲洗 1CV;
4.4 用纯化⽔冲洗 4 CV;
4.5 介质的保存:20%乙醇溶液室温保存。