
产品简介
3X Flag Peptide (3X Flag多肽)是一种常用于通过竞争性结合Anti-Flag抗体,从而在免疫沉淀时洗脱与Anti-Flag抗体结合的Flag融合表达蛋白的多肽。本产品用于免疫沉淀时Flag融合表达蛋白的洗脱。3X Flag Peptide (3X Flag多肽)由23个氨基酸组成,含有3组Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp重复多肽。在C端的8个氨基酸组成经典的Flag标签(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys; DYKDDDDK)。
-20℃ 保存,有效期 1年
使用方法
免疫沉淀样品的3X Flag竞争洗脱法:本方法为非变性法,洗脱效率高且洗脱后的样品中不含Flag抗体的轻链和重链。
1. 3X Flag多肽洗脱液的配制:根据样品量确定洗脱液的用量,取一定量3X Flag多肽储存液用TBS溶液进一步稀释3X Flag多肽溶液至150μg/ml。
2. 每个免疫沉淀样品加入100μl 3X Flag多肽洗脱液(150μg/ml),冰浴并摇晃孵育30分钟-2小时,为了提高洗脱效率,可延长孵育时间或重复洗脱。3X Flag多肽洗脱液体积一般为凝胶悬液的5倍。
3. 4ºC,6000×g离心30秒,小心转移上清至新管中,上清即为洗脱的Flag融合蛋白。注意不要吸到凝胶。
4. 洗脱的Flag融合蛋白置于4ºC待用,或者-20ºC长期保存。