400-6869-840   /   010-60608020
您好,欢迎访问北京兰博利德官网
二开
  • miRNA茎环法荧光定量试剂盒(货号:MR1201)
  • miRNA茎环法荧光定量试剂盒(货号:MR1201)

    -
    • ¥0.00
      ¥0.00
    • 试剂规格:
    • 200T
CAS:
-


 MR1201-25T,MR1201-50T

储存条件:干冰或蓝冰运输,-20°C 避光保存,避免反复冻融,有效期为 12 个月。如每次使用量较少,推荐小份分装使用。

产品成分

 

25T

50T

2× miRNA

SYBR Mastermix

1.0ml ×2

1.0ml ×4

Tag Primer

80ul

160ul

ddH2O

1.0ml ×2

500μl

产品介绍

miRNA Stem-loop SYBR qPCR Kit 采用本公司生产的化学修饰的热启动聚合酶,使用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行 miRNA 的荧光扩增,具有高度的特异性,能够有效避免引物二聚体形成和其它形式的非特异扩增。反应缓冲液经充分优化,PCR 扩增效率高,荧光信号强,拥有更高的反应灵敏度。

产品特点

1、使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,可有效避免非特异扩增;

2、反应缓冲液经充分优化,PCR 扩增效率高,反应灵敏度优于多家同类产品。

质量控制

以合成的 U6 为样本,使用本试剂盒,茎环反转录,按说明书进行 qPCR,CT 值小于 20。

 使用方法:

11.RT 反应液配制:

 RNase-free 离心管,配制如下混合液:

2× miRNA SYBR Mastermix

10μl

Tag Primer(10uM)

0.4μl

Specific primer(10uM)

0.4μl

Temlate DNA/cDNA

2.0μl

ddH2O

To 20μl

 二、设置反应条件:

激活 Taq

95℃ 5min

PCR 循环

95℃ 10S; 60℃ 30S; 40 循环

熔解曲线

95℃ 15S;60℃ 1min;95℃ 15S;1 循环

注意事项

1、一般来说反应体系中引物终浓度为 0.2μM 可得到较好的扩增效果。当反应结果不理想时,可以在 0.1-1.0μM 范围内调整引物浓度。

2、未稀释的 cDNA 模板,加样体积最好不超过 2.0ul,对于丰度较高的 miRNA, cDNA 样本可适当稀释后再进行 qPCR,稀释倍数可根据反应

CT 值而定。

3、如 PCR 结果不甚理想,可考虑采用 3 段法温度设置进行扩增,扩增条件为:95℃ 5min; 95℃ 10S;60℃ 20S;70℃ 20S(收 集荧光信号)。

4、试剂保存与操作过程中避免强光照射。

5、配制反应体系时,避免过于震荡,以防气泡产生。 


400-6869-840
客服电话
010-6060-8020
联系电话
PRODUCT CENTER
产品中心

您好,欢迎访问北京兰博利德官网