CAS:
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货号：BL0021
存储条件：-80 至-65°C 保存，干冰运输
产品说明
本品是用大肠杆菌 BL21(DE3)菌株制备的化学转化超级感受态细胞，转化效率超过 10 7 cfu/μg。适用于克隆在含有噬
菌体 T7 启动子的表达载体(如 pET 系列)中的基因高效原核表达。
适用范围
适用于克隆在含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(如 pET 系列)中的基因高效原核表达；适合表达非毒性蛋白。
基因型：F- ompT hsdS(rB-, mB-) gal dcm (DE3）
实验流程
1. 将感受态细胞从-70℃拿出，迅速置于冰上融化。
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μl 感受态细胞中，轻弹管壁混匀(避免用枪吸打)，冰上静置 30 min。
3. 42℃水浴热激 90 sec 后，迅速置于冰上静置 2 min，切勿摇动离心管。
4. 向离心管中加入 900 μl LB 或 SOC 液体培养基(不含抗生素)，混匀后置于 37℃，200 rpm 摇床中复苏 1 h。
5. 5,000 rpm(2,500 × g)，离心 3 min，弃掉 900 μl 上清，用剩余培养基将菌体重悬后，均匀涂布在含相应抗生素的 LB固体培养基平板上。
6. 将平板正置于 37℃培养箱 10 min，待菌液被完全吸收后，倒置平板，过夜培养
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用，长时间放置会降低转化效率。
2. 待转化 DNA 加入体积不要超过感受态细胞体积的 1/10。
3. 加入质粒或连接产物后，请勿用移液枪吸打，轻弹混匀即可。
4. 避免将感受态细胞反复冻融。
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