您好,欢迎来到兰博利德
二开
文
400-6869-840   /   010-60608020
  • Taq-HS Probe qPCR Premix(货号:P0211)
  • Taq-HS Probe qPCR Premix(货号:P0211)

    -
    • ¥0.00
      ¥0.00
CAS:
-


货号:P0211

存储条件:长期储存请于  -20℃避光保存,Mix 融解后可在 4℃避光条件下稳定存放一个月,尽量避免反复冻融。

  产品组分

试剂

规格

Taq-HS Probe qPCR Premix(Universal)

5×1 ml

 

产品说明

Taq-HS Probe qPCR Premix 是基于独特的双组份热启动 Taq 聚合酶开发的实时定量 PCR 用 2×预混液。本产品已包含除引物和样品  DNA 以外的所有荧光定量  PCR组分,可减少操作步骤,缩短加样时间,降低了污染几率,适用于以 cDNA 或  DNA 为样品的 TaqMan 探针法检测。

本产品含有独特校正染料,与一系列 qPCR 设备兼容,包括需要 ROX 校正的仪器,实验操作过程中不需要额外添加染料来校正仪器。


使用方法

1. 使用注意

① 因 Mix  中预混有染料,其保存或反应体系配制过程应避免强光照射;

② 使用前上下颠倒轻轻混匀  Mix,请勿涡旋振荡混匀,避免产生过多气泡 ;

③  Mix 中含有 Universal  校正染料,适用于所有机型,无需额外添加染料。

2.  建议的反应体系

试剂

使用量

终浓度

Taq-HS Probe qPCR Premix

10μ l

1 ×

 

正向引物  (10μM)a

0.4μ l

0.2μM

反向引物(10μM)a

0.4μ l

0.2μM

TaqMan探针(5μM)b

1μ l

0.25μM

DNA 模板c

Xμl

10 ~200ng/20ul

Nuclease-Free Water

To 20  μ l


a.  引物推荐终浓度为 0.2  μM,效果不佳时可以在 0.1~1μM 进行调整;引物长度请设定在 80-25bp,GC 含量为 40-60%。最佳效率的扩增目标片段一般为 80-200bp,设计时应尽量避免发夹结构、二聚体等复杂结构,并尽可能横跨内含子区域。

b. 探针终浓度推荐为 0.25  μM,效果不佳时可以在 0.1~1  μM 进行调整 ;

c. 模板添加量不应超过总反应体系的 10%,推荐加样量为  1~2  μl。不同种类 DNA 模板中含有的靶基因拷贝数目不同,必要时可进行梯

度稀释,以确定最佳的 DNA 模板添加量。

3 . qPCR 反应程序(可根据机型适当调整)两步法

步骤

温度

时间


预变性

95℃

5 min


变性

95℃

10 sec

40 cycles

退火  & 延伸

60℃

30 sec


注意事项

1. 使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。

2. 避免反复冻融 Mix,开启后尽量在 3 个月内使用完毕。


 

 

 

 


400-6869-840
客服电话
010-6060-8020
联系电话
PRODUCT CENTER
产品中心

您好,欢迎访问北京兰博利德官网