货 号：MF1201
储存条件：-20°C 储存，有效期 1 年，避免反复冻融。干冰或蓝冰运输
产品成分
组 分 | 25T | 50T |
RNase free ddH2O | 500μl | 500μl |
RTase Mix | 50μl | 100μl |
2xRT Buffer | 250μl | 500μl |
产品介绍
LABLEAD miRNA 茎环法逆转录试剂盒配置了高效的基因工程优化的逆转录酶，可大幅提升 miRNA RT 反应的效率。特别设计的茎环引物能够特异性地互补结合目的miRNA，通过RT反应获得加长的miRNA cDNA，该加长cDNA不仅可用于染料法qPCR, 还可用于探针法qPCR，后续检测非常方便。
产品特点
1、高效的基因工程优化的逆转录酶，可大幅提升 miRNA RT 反应的效率；
2、特别设计的茎环引物能够特异性地反转录目的 miRNA，获得加长的miRNA cDNA，不仅可用于染料法 qPCR, 也可用于探针法 qPCR。
质量控制
以合成的 U6 为样本，使用本试剂盒，茎环反转录，取 1/10 cDNA 产物进行 qPCR，CT值小于20。
使用方法：
11.RT 反应液配制：
取 RNase-free 离心管，配制如下混合液：
RNase free ddH2O | to 20μl |
RTase Mix | 2μl |
2xRT Buffer | 10μl |
Stem-loop primer（2uM） | 1μl |
Total RNA | 10pg~1μg |
轻轻混匀，5000rpm 离心 5s。
2.cDNA 合成反应
反应完毕后，5000rpm 离心 5s，尽快放于冰上，直接进行 PCR 反应，如暂时不用，请放置于-20°C 以下温度，在半年内使用完毕，不要反复冻融。
反应温度 | 时间 |
25℃ | 5min |
50℃ | 15min |
85℃ | 5min |
3. 注意事项：
3.1 用于 RT 反应的器具和水应进行 RNase 灭活处理，操作人员应佩戴口罩、手套等，以防 RNase 污染。
3.2 模板 RNA 使用量：Total RNA 可在 10pg~1μg 之间。
3.3 试剂配制过程建议在碎冰上进行，BIOG RTase Mix 粘度较大，应缓慢吸取，Tip 头不要插入液体太深，以免粘染太多酶液。
